血漿miR-26b和miR-30a對高血壓性左室肥厚和肥厚型心肌病診斷價值的研究.pdf

1、研究背景：
　　高血壓性心臟病是指因長期血壓控制不佳而引起的左心室肥厚和左心室舒張功能減退，進而進展為心力衰竭的疾病。高血壓性左心室肥厚（Hypertensive left ventricular hypertrophy，HTN-LVH）是高血壓性心臟病的特征性表現(xiàn)之一。肥厚型心肌?。℉ypertrophic Cardiomyopathy，HCM）是一種遺傳性心肌病，特征為心室壁呈不對稱性肥厚，主要表現(xiàn)為室間隔肥厚，但也存在左心室

2、肥厚，因此臨床中HCM與HTN-LVH有時也難以鑒別。眾所周知，左心室肥厚是高血壓病導(dǎo)致的常見靶器官損害之一，研究顯示左心室肥厚還是心腦血管事件的獨立危險因素[1]，此外，左心室肥厚的發(fā)生發(fā)展常導(dǎo)致心力衰竭和猝死等不良的預(yù)后結(jié)果。因此，左室心肌肥厚的早期診斷和有效防治顯得尤其重要。近年來，微小RNA（microRNAs，miRNAs）成為心血管領(lǐng)域的研究熱點，miRNAs在心血管疾病病理生理過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用[2]，它參與了心臟

3、重構(gòu)、心臟發(fā)育、冠脈血管病變、心律失常等過程。眾多的動物實驗研究表明miR-26a、miR-26b、miR-30a和miR-34a等參與調(diào)控心肌肥厚的過程，并且發(fā)現(xiàn)HTN-LVH患者的血漿miR-30a水平與室間隔舒張末期厚度（Interventricular septal thickness at end-diastole，IVSd）和左心室后壁舒張末期厚度（Left ventricular posterior wall thickn

4、ess at end-diastole，LVPWd）呈正相關(guān)，且血漿中的miR-30a可能是左心室肥厚診斷的重要指標[3-7]。此外，有研究對2種不同心肌肥厚模型的小鼠心肌組織miRNAs表達譜進行芯片技術(shù)篩查，發(fā)現(xiàn)miR-30a和miR-30e在主動脈縮窄致心肌肥厚模型組的肥厚心肌組織中表達下調(diào)，而在基因突變心肌肥厚模型組中miR-30a和miR-30e表達是上調(diào)的[8]，這為利用miRNAs表達的差異來鑒別不同原因所致的心肌肥厚提供

5、了方向。但這些研究多局限于在動物實驗研究中，目前在左心室肥厚患者中的研究報道較少。因此進一步探討患者血漿中miRNAs與心肌肥厚之間的關(guān)系以及探討miRNAs對診斷左心室肥厚的臨床意義是非常有必要的。
　　研究目的：
　　很多體外及動物實驗表明，miR-26b、miR-30a參與了心臟肥厚及心肌重構(gòu)的發(fā)生發(fā)展，但在心室肥厚患者體內(nèi)的作用還待進一步證實。本實驗旨在研究患者血漿中miR-26b和miR-30a與HTN-LVH和H

6、CM的相關(guān)性以及對HTN-LVH和HCM患者的診斷價值，并進一步探討miR-26b和miR-30a對鑒別HTN-LVH與HCM患者的臨床意義。
　　研究方法：
　　按照本研究的納入標準和剔除標準收集2012年12月至2014年10月間到廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心血管內(nèi)科住院部住院的患者，共收集到符合本研究的患者176例，根據(jù)本研究的納入標準和剔除標準分為HTN-LVH組（n=69）、HCM組（n=36）和高血壓無肥厚的對照組

7、（n=71）三組。收集所有患者的年齡、性別、高血壓病史、收縮壓、舒張壓、空腹血糖、糖化血紅蛋白、總膽固醇、總甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、超敏C反應(yīng)蛋白、血肌酐、谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶、肌酸激酶MB同工酶、B型腦鈉肽、左室內(nèi)徑、右室內(nèi)徑、室間隔厚度、左心室后壁厚度和左室射血分數(shù)。入院次日清晨空腹抽取患者靜脈血，采用枸櫞酸鈉抗凝，經(jīng)2次離心后將血漿保存在-80℃冰箱，待一起用試劑盒提取總miRNA

8、s,再進行miRNAs的逆轉(zhuǎn)錄，最后用實時熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（Quantificational reverse transcription polymerase chain reaction，qRT-PCR）檢測三組患者血漿中的miR-26b和miR-30a水平。統(tǒng)計學(xué)處理，采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件進行分析，首先應(yīng)用Shapiro-Wilk檢驗法和Levene檢驗法對所有統(tǒng)計的計量資料進行正態(tài)性檢驗和方差齊性檢驗，對于符合

9、正態(tài)分布且方差齊的計量資料用均數(shù)±標準差表示，對于不符合正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)表示；計數(shù)資料用百分數(shù)（％）和例數(shù)（n）表示。對于符合正態(tài)分布的計量資料三組間采用單因素方差分析；計數(shù)資料三組間采用多組獨立二分類χ2檢驗進行比較。組內(nèi)的miR-26b、miR-30a與室壁厚度的相關(guān)性用Pearson相關(guān)分析法分析。使用MedCalc12.7軟件比較受試者工作特征曲線（Receiver operating characteristic c

10、urve，ROC曲線）并統(tǒng)計曲線下面積（Area under the curve，AUC），來評價miR-26b、miR-30a對心肌肥厚的診斷價值。所有分析檢驗方法中均以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.血漿miR-26b水平在HTN-LVH組和HCM組均明顯低于高血壓無肥厚組（P<0.05），在HTN-LVH組和HCM組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義；血漿miR-30a水平在HTN-LVH組和HCM組均明顯高

11、于高血壓無肥厚組（P<0.05），在HTN-LVH組和HCM組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　2.HTN-LVH組和HCM組中miR-26b與IVSd、LVPWd呈負相關(guān)，miR-30a與IVSd、LVPWd呈正相關(guān)。
　　3.血漿miR-26b和miR-30a對診斷HTN-LVH和HCM有意義（AUC>0.5，P<0.01），miR-26b和miR-30a對HTN-LVH診斷的敏感度分別為81.2%、84.1%，特異度分別為7