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文檔簡介
1、目的:
研究去迷走神經(jīng)對大鼠再生肝中Atf3和Nr2f1的表達影響,進一步探討迷走神經(jīng)在肝再生過程中的作用及其調(diào)控機制。
方法:
將108只雄性大鼠分為隨機的2組:PH組:2/3肝切除組;PHV組:去迷走神經(jīng)2/3肝切除組。分別在術(shù)后0h、2h、12h、24h、36h、48h、72h、120h、168h處死,取大鼠的肝臟并分成兩份,一份保存在中性福爾馬林試劑中,另一份保存于液氮中。用免疫組織化學(xué)方法和免疫印
2、跡法(Western Blot)檢測肝組織中Atf3和Nr2f1蛋白的表達;實時熒光定量法(RT-PCR)檢測肝組織中Atf3mRNA和Nr2f1 mRNA的表達。
結(jié)果:
(1)免疫組化法檢測大鼠再生肝中Atf3的表達:PHV組大鼠在術(shù)后24h~36h的陽性表達量明顯高于PH組(P<0.01),在12h和48h表達量低于PH組。
(2)免疫組化法檢測大鼠的再生肝中Nr2f1的表達:相對于PH組來說,PHV
3、組大鼠的表達量在術(shù)后12h、36h、48h、72h、168h低于PH組,在術(shù)后2h、24h、120h處表達量稍高于PH組,36h表達量上升到最高,在術(shù)后12h、48h和168h時與PH組有顯著性差異(P<0.05)。
(3)RT-PCR法檢測大鼠再生肝組織中Atf3 mRNA的表達結(jié)果:與PH組相對比,PHV組的大鼠術(shù)后24h~36h肝組織內(nèi)Atf3 mRNA的表達量上升,且高于PH組,在術(shù)后2h、36h和120h有顯著性差異
4、(P<0.05)。
(4)RT-PCR法檢測大鼠再生肝組織中Nr2f1 mRNA的表達結(jié)果:與PH組相對比,PHV組的大鼠,手術(shù)后Nr2f1 mRNA的表達量在0h~168h基本都低于PH組,在術(shù)后12h和48h有極顯著差異(P<0.05)。
(5)WB法檢測大鼠的再生肝組織中Atf3的蛋白的表達結(jié)果:與PH組相對比,PHV組大鼠手術(shù)后至48h表達量高于PH組,在48h~120h表達量低于PH組,有顯著性差異(P<0
5、.05)。
(6)WB法檢測大鼠再生肝組織中Nr2f1的蛋白表達結(jié)果:與PH組相比,PHV組大鼠術(shù)后Nr2f1的蛋白量表達變化與PH組的變化相似,但整體都比PH組的表達量低,與PH組相比有顯著性差異(P<0.01)。
結(jié)論:
(1)研究結(jié)果進一步提示去迷走神經(jīng)可能對大鼠肝組織再生起促進作用。
(2)去迷走神經(jīng)對大鼠肝再生的促進作用,可能是通過促進再生肝組織中Atf3的表達,抑制再生肝組織中Nr2f
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