蒼耳子毒性部位的提取工藝及成分分析.pdf

1、蒼耳子始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，名為葈耳實(shí)；蒼耳子之名首見(jiàn)于《千金食治》,歷版《中國(guó)藥典》均有收載，系菊科蒼耳屬植物蒼耳Xanthium sibiricum Patr.干燥成熟帶總苞的果實(shí)。味辛苦、性溫,具有散風(fēng)寒，祛風(fēng)濕、通鼻竅的功能，為中醫(yī)臨床治鼻炎、痹癥的要藥。在我國(guó)分布十分廣泛，藥用歷史沿革久遠(yuǎn)，為傳統(tǒng)的鼻科疾病良藥，然而蒼耳子生品有毒，藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，蒼耳子中毒性成分為貝殼杉烯苷類成分，主要包括蒼術(shù)苷與羧基蒼術(shù)苷等。臨床應(yīng)用其炮

2、制品，且藥理實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用皆表明:蒼耳子炮制后，毒性明顯降低。但對(duì)于其毒性降低的機(jī)理以及炮制對(duì)其毒性成分的影響尚不清楚。因此，本論文采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的方法，優(yōu)選出蒼耳子毒性部位最佳提取及純化工藝；對(duì)其毒性部位提取物進(jìn)行了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，并進(jìn)行了化合物的分離和結(jié)構(gòu)鑒定研究。采用液質(zhì)聯(lián)用的方法對(duì)其炮制前后毒性部位的化學(xué)成分進(jìn)行了比較研究，主要有以下內(nèi)容：
　　1.蒼耳子毒性部位的提取及純化工藝的優(yōu)選
　　采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法，以毒性

3、部位提取物中貝殼杉烯苷類化合物的含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選出了蒼耳子毒性部位的提取工藝。結(jié)果顯示：蒼耳子以10倍水提三次，每次1小時(shí)為蒼耳子毒性部位的最優(yōu)提取工藝。
　　選用D-101大孔樹(shù)脂對(duì)蒼耳子毒性部位進(jìn)行純化富集，采用正交試驗(yàn)的方法對(duì)上樣液濃度、洗脫流速、大孔樹(shù)脂柱的徑高比三個(gè)因素進(jìn)行優(yōu)選，結(jié)果顯示最佳吸附條件為上樣液濃度1.0g生藥/mL，洗脫流速1BV/h，徑高比為1：8時(shí)大孔樹(shù)脂的洗脫量最大；在此基礎(chǔ)上對(duì)上樣量及洗脫劑用量

4、進(jìn)行考察，結(jié)果顯示上樣量：樹(shù)脂體積為0.5:1時(shí)，不會(huì)出現(xiàn)上樣液泄漏，洗脫劑用量為4倍柱體積時(shí)可將上樣液中貝殼杉烯苷類成分全部洗脫下來(lái)。并通過(guò)中試放大研究，對(duì)所確定的蒼耳子最優(yōu)提取及純化工藝參數(shù)進(jìn)行了驗(yàn)證研究。
　　2.蒼耳子毒性部位提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究
　　按照《中國(guó)藥典》附錄所收載檢查方法，對(duì)蒼耳子毒性部位提取物進(jìn)行了水分檢查，采用單因素試驗(yàn)的方法，建立了以比色法測(cè)定蒼耳子毒性部位提取物中貝殼杉烯苷類成分含量的方法，對(duì)提

5、取物中總貝殼杉烯苷類成分進(jìn)行了含量測(cè)定。采用高效液相色譜法，對(duì)蒼耳子毒性部位提取物中兩種主要有效成分（綠原酸和1,5-二咖啡酰喹寧酸）以及兩種主要毒性成分（蒼術(shù)苷和羧基蒼術(shù)苷）進(jìn)行了含量測(cè)定。
　　3.蒼耳子毒性部位成分研究
　　針對(duì)蒼耳子毒性部位，采用硅膠柱色譜反復(fù)洗脫，并結(jié)合Sephadex LH-20凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜等技術(shù)手段進(jìn)行分離純化，最終從所選擇的目標(biāo)成分群中分離得到兩個(gè)化合物：2-O-[2-O-I

6、sovaleryl-β-D-glucopyranosyl]-4-epi-atractyligenin(1)和β-胡蘿卜苷（2），其中化合物（1）為首次從蒼耳子中分離得到。
　　4.基于HPLC-MS法的蒼耳子炮制前后毒性部位化學(xué)成分比較研究
　　對(duì)蒼耳子生品及其炒品毒性部位，采用HPLC-MS技術(shù)手段進(jìn)行分析，共檢測(cè)出了22個(gè)主要成分峰，并進(jìn)行了歸屬，通過(guò)比較兩者色譜圖后發(fā)現(xiàn)，蒼耳子炒制后，其毒性成分4’-去磺基蒼術(shù)苷含量明