MKP-1在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制中的作用研究.pdf

1、研究目的：研究絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1（MKP-1）在子宮內(nèi)膜異位癥（內(nèi)異癥）發(fā)病機(jī)制中的作用。
　　方法：收集內(nèi)異癥患者和輸卵管性不孕患者內(nèi)膜組織（對照組），分別通過實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-time PCR）、蛋白免疫印跡（Western blot）以及免疫組化（IHC）等實(shí)驗(yàn)方法從基因轉(zhuǎn)錄水平（mRNA）和蛋白水平分析MKP-1在內(nèi)異癥患者異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜以及對照組子宮內(nèi)膜中的表達(dá)情況；分離并培養(yǎng)異位子宮內(nèi)

2、膜間質(zhì)細(xì)胞（ESCs），通過Small interfering RNA（siRNA）干擾技術(shù)沉默MKP-1，研究MKP-1對ESCs遷移、增殖的影響，分析IL-4、IL-6、COX-2以及VEGF等相關(guān)基因的表達(dá)是否因MKP-1的沉默而發(fā)生改變；分離并培養(yǎng)內(nèi)異癥患者子宮內(nèi)膜在位間質(zhì)細(xì)胞(以下簡稱為EESCs)，分別予以雌激素與脂氧素刺激，檢測細(xì)胞中MKP-1的表達(dá)變化，分析MKP-1是否參與雌激素和炎癥反應(yīng)對內(nèi)異癥的調(diào)控。
　　結(jié)

3、果：MKP-1在內(nèi)異癥以及對照組中的表達(dá)：MKP-1在內(nèi)異癥患者的異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜以及對照組中的表達(dá)呈現(xiàn)依次遞減的趨勢。內(nèi)異癥患者的異位內(nèi)膜中表達(dá)最高，與對照組比較，差異具有極顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(*** P＜0.0001)，內(nèi)異癥患者的在位內(nèi)膜高于對照組正常內(nèi)膜，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(* P＜0.05)，但內(nèi)異癥患者自身配對的在位內(nèi)膜與異位內(nèi)膜比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.4861)。MKP-1對異位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞生物學(xué)行為的影響：（1

4、）MKP-1沉默抑制ESCs增殖。（2）MKP-1沉默促進(jìn)ESCs的遷移。同時(shí)，MKP-1沉默誘導(dǎo)IL-4基因的表達(dá)，其表達(dá)水平顯著高于對照組（** P＜0.01，）。MKP-1沉默抑制IL-6的表達(dá)、促進(jìn)了COX-2和VEGF的表達(dá)，但數(shù)據(jù)沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。雌激素及脂氧素調(diào)節(jié)EESCs中MKP-1的表達(dá)：（1）雌激素促進(jìn)EESCs表達(dá)MKP-1（2）脂氧素促進(jìn)EESCs表達(dá)MKP-1。
　　結(jié)論：臨床樣品分析表明MKP-1在內(nèi)異癥