肥大細胞在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機理中作用的研究.pdf

1、背景:
　　子宮內(nèi)膜異位癥（以下簡稱內(nèi)異癥）是指具有生長功能的子宮內(nèi)膜組織（腺體和間質(zhì)）出現(xiàn)在子官腔被覆蓋內(nèi)膜及宮體肌層以外的其他部位的婦科常見疾病，嚴重影響婦女身心健康.疼痛（包括痛經(jīng)、性交痛和慢性盆腔痛等）和不孕是內(nèi)異癥的主要臨床癥狀，其患病率在育齡婦女中達10-15％。雖然內(nèi)異癥發(fā)病率呈現(xiàn)增高趨勢，但其病因和發(fā)病機制以及相應(yīng)內(nèi)異癥疼痛的發(fā)生機制至今仍然不清。近年大量研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)異癥病灶內(nèi)出血刺激導致無菌性炎癥，免疫炎癥以及病

2、灶神經(jīng)異常生長導致中樞與外周神經(jīng)敏化可能是內(nèi)異癥疼痛的主要發(fā)病機制。
　　肥大細胞(Mast cells，MC)是免疫炎癥反應(yīng)中的重要細胞之一，一些學者研究發(fā)現(xiàn)MC脫顆粒與偏頭痛、間質(zhì)性膀胱炎、腸易激綜合癥、異位性皮炎等疾病的疼痛癥狀有明顯的相關(guān)性。在神經(jīng)病理性疼痛中，分布于神經(jīng)和神經(jīng)周圍組織的MC即可脫顆粒釋放類胰蛋白酶、腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor-α，TNF-α)、神經(jīng)肽、P物質(zhì)(Substanc

3、e P，SP)、神經(jīng)生長因子（Nerve growth factor，NGF）、細胞因子以及神經(jīng)遞質(zhì)如乙酰膽堿等活性介質(zhì)導致神經(jīng)敏化，而敏化的神經(jīng)可釋放大量神經(jīng)遞質(zhì)反過來激活MC促使其脫顆粒釋放致痛物質(zhì)，進一步促進神經(jīng)敏化，從而導致神經(jīng)病理性疼痛的持續(xù)狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)異癥病灶存在MC數(shù)量增加以及其活性增強，且病灶中MC與神經(jīng)纖維之間密切相關(guān)。內(nèi)異癥疼痛目前認為也是一種內(nèi)臟和神經(jīng)病理性疼痛，因而MC在內(nèi)異癥疼痛發(fā)生機制中發(fā)揮作用。

4、>　　研究表明，雌激素可結(jié)合MC膜上ER-α啟動快速的鈣離子流，促進人及小鼠MC活化脫顆粒釋放相應(yīng)的介質(zhì)。色甘酸鈉是MC膜穩(wěn)定劑，能抑制其釋放介質(zhì)，其作用機制可能與MC78-kDa蛋白磷酸化有關(guān)。78-kDa蛋白由兩段與MC膜突蛋白同源的染色體組成，在細胞表面與細胞內(nèi)構(gòu)架之間通過調(diào)節(jié)性功能的連接而參與信號傳導，一旦膜突蛋白在磷酸化/脫磷酸化作用下結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，將導致細胞膜和細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的位置重排，并可能使MC分泌顆粒。
　　基于以

5、上研究，我們設(shè)計了本實驗，首先建立SD大鼠內(nèi)異癥模型，在此基礎(chǔ)上我們給予MC脫顆粒促進劑（雌激素）及抑制劑（色甘酸鈉）干預后，觀察模型病灶大小變化以及與MC脫顆粒的關(guān)系，探討MC在內(nèi)異癥發(fā)病中的作用，為臨床內(nèi)異癥疼痛的治療提供新思路。
　　目的:
　　探討肥大細胞在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機理中的作用。
　　材料和方法:
　　取健康雌性未孕SD大鼠60只，采用自體子宮內(nèi)膜移植法建立大鼠腹壁內(nèi)異癥模型，分兩部分進行:第一

6、部分（每組8只）大鼠造模后即每天臀部肌肉注射不同劑量雌激素（高劑量組:造模時同時切除雙側(cè)卵巢后給予外源性雌激素200μg/kg，低劑量組:造模時同時切除雙側(cè)卵巢后給予外源性雌激素100μg/kg，單純造模組:造模時不切除雙側(cè)卵巢不給予外源性雌激素），兩周后觀察其對大鼠內(nèi)異癥病灶的大小，組織形態(tài)的影響，每組處死4只大鼠取材，剩余大鼠繼續(xù)注射相應(yīng)劑量雌激素兩周，取材，比較病灶MC總數(shù)及其脫顆粒數(shù)、類胰蛋白酶、NGF的表達，血清TNF-α、雌

7、二醇(Estradiol，E2)水平;第二部分（分別10只、10只、8只、8只）大鼠造模兩周后觀察大鼠內(nèi)異癥病灶的大小，隨后每天腹腔注射不同劑量色甘酸鈉（高劑量組20 mg/kg，低劑量組10 mg/kg，溶劑組，空白對照組），連續(xù)用藥兩周處死取材，檢測指標同上。
　　統(tǒng)計方法
　　SPSS20.0軟件進行分析，結(jié)果以(X)±S表示，進行正態(tài)性和方差齊性檢驗，多組間數(shù)據(jù)比較用單因素方差分析，兩組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗，檢驗水準

8、取0.05.
　　結(jié)果:
　　1.雌激素干預組兩周和四周時血清E2濃度均顯著高于單純造模組（P＜0.05），四周時高劑量雌激素干預組血清TNF-α濃度顯著高于單純造模組(P＜0.05)。
　　2.雌激素干預組兩周和四周病灶體積顯著大于單純造模組(P＜0.05)。
　　3.無論是兩周還是四周，低劑量雌激素干預組甲苯胺藍染色脫顆粒/總的MC數(shù)比值顯著高于單純造模組(P＜0.05)。
　　4.雌激素干預組與單純造

9、模組間病灶類胰蛋白酶的表達未見明顯差異(P＞0.05)，四周時高劑量雌激素組NGF的表達顯著高于單純造模組(P＜0.05)。
　　5.色甘酸鈉治療組與溶劑組、空白對照組間血清E2水平無明顯差異(P＞0.05)，色甘酸鈉高劑量治療組血清TNF-α濃度顯著低于溶劑組和空白對照組(P＜0.05)。
　　6.色甘酸鈉干預組兩周和四周時病灶體積與溶劑組、空白對照組均無明顯差異(P＞0.05)。
　　7.色甘酸鈉高劑量治療組甲苯胺

10、藍染色活化的MC數(shù)顯著顯著低于溶劑組(P＜0.05)，脫顆粒/總的MC數(shù)比值顯著低于溶劑組和空白對照組(P＜0.05)。
　　8.色甘酸鈉高劑量治療組類胰蛋白酶表達顯著低于溶劑組和空白對照組(P＜0.05)，色甘酸鈉治療組NGF的表達略低于溶劑組和空白對照組，但統(tǒng)計學上無明顯差異(P＞0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.雌激素可促進內(nèi)異病灶的生長，可通過激活肥大細胞，促使其脫顆粒釋放TNF-α、NGF介導內(nèi)異癥的發(fā)病。<