CK19與cyclinD1-CDK4、NF-κB在乳腺干細胞及其病變中的表達和相關性研究.pdf

1、目的： 干細胞是一類具有自我更新和多向分化潛能的特殊細胞。正常情況下，干細胞的自我更新和分化能力受到嚴格的調控，一旦這種機制被破壞，細胞就會無限制的生長、繁殖、形成異常新生物，即腫瘤。乳腺腫瘤雖然組織類型復雜，但其組織發(fā)生卻有其同源性，都來自于乳腺上皮干細胞。同時，乳腺癌干細胞作為第一個在實體瘤中被鑒定的腫瘤干細胞受到廣泛關注。 同其他器官一樣，乳腺干細胞也是多潛能的，可以產生各級祖細胞，并最終分化成肌上皮和導管上皮。雖

2、然乳腺組織中存在干細胞，但還是缺乏特異性的乳腺干細胞標記物。乳腺中的細胞角蛋白的表達在某種程度上反應了細胞的分化，角蛋白19（CK19）是在胚胎最早表達的角蛋白之一，常在乳腺末梢小管腺泡單位（Terminal Duct Lobular TDLU）的腺上皮細胞表達，在胎兒的乳腺中包含有CK19陽性的腺上皮細胞，目前被認為是乳腺干細胞的標志。 本實驗應用免疫組化檢測乳腺上皮干細胞標記物CK19，轉錄因子NF-κB和細胞周期素cycl

3、inD1及其依賴激酶CDK4在正常乳腺組織、乳腺增生癥及浸潤性導管癌中的表達，探討細胞周期在成人乳腺上皮干細胞分化和演變中的作用，揭示乳腺上皮干細胞分化及發(fā)生惡性轉化時演變規(guī)律和機制。 方法： 1．采用免疫組化SP法分別檢測10例正常乳腺組織、17例乳腺增生癥、38例浸潤性乳腺癌中干細胞標記物CK19的表達情況，探討CK19在乳腺干細胞及其病變的表達與分化的關系。 2．采用免疫組化SP法分別檢測細胞周期調控蛋白c

4、yclinD1和CDK4及核轉錄因子NF-κB的表達情況，并對它們在乳腺正常組織、良性增生組織、乳腺腫瘤分化程度上的差異及它們各自之間的相關性進行觀察總結。 結果： 1．CK19在乳腺正常組織、增生、浸潤癌組織中的表達逐漸增多，在此三種乳腺組織中的表達存在差異，P<0．05。乳腺組織中CK19陽性表達率為41．5%，低分化的乳腺癌CK19陽性表達率為100%，顯著高于高分化的乳腺癌（25．0%），差異具有統(tǒng)計學意義（P<

5、0．05）。浸潤型導管癌1級、2級和3級CK19陽性表達率分別為25．0%、50．0%、100%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0．05）。 2．cyclinD1在正常乳腺組織無表達，乳腺增生病中陽性率為11．8%，38例乳腺癌中有14例表達，陽性率為47．4%，正常和增生組織與乳腺癌之間表達有明顯差異（P<0．05）。 3．CDK4在正常乳腺組織、乳腺增生性疾病和浸潤性導管癌中均有表達，其陽性率分別為10．0%、17．6%、4

6、5．9%，各組織類型之間的表達有顯著的差異（P<0．01）。 4．NF-κB在正常乳腺組織、乳腺增生性疾病、浸潤性導管癌中均有表達，其陽性率分別為20．0%、35．3%、66．0%，各組織類型之間存在差異性（P<0．05）。 5．經Spearman相關分析發(fā)現(xiàn)： 乳腺癌中CK19和cyclinD1的表達呈現(xiàn)正相關，相關系數(shù)r=0．535，P=0．038：乳腺癌中CK19和CDK4的表達呈顯著正相關，相關系數(shù)r=0

7、．821，P=0．00乳腺癌中cyclinD1和NF-κB的表達呈顯著正相關，相關系數(shù)r=0．671，P=0．00。 結論： 1．CK19在乳腺癌組織中的表達水平高于正常乳腺組織和乳腺增生病，進一步證實了乳腺癌組織中可能存在具有自我更新和分化潛能的干細胞樣細胞的理論研究。 2．CK19在乳腺癌組織中表達與分化程度關系密切，提示CK19與乳腺癌惡性程度有關，可能是評估乳腺癌預后的重要生物學指標之一。 3．C

8、yclinD1/CDK4在乳腺癌組織中的表達水平高于正常乳腺組織和乳腺增生病，CK19與cyclinD1/CDK4的表達陽性數(shù)相關性分析顯示，兩者呈正相關，提示細胞周期的紊亂是乳腺干細胞分化異常的重要原因。 4．CyclinD1/CDK4與NF-κB在各乳腺組織類型中的表達顯示，兩者呈顯著正相關，說明在乳腺干細胞癌變過程中，NF-κB的過表達可能促進了cyclinD1/CDK4的表達，其機制可能是由于cyclinD1啟動子含有N