乳腺癌組織中COX-2、VEGF、CD105在的表達及其臨床意義.pdf

1、前言: 腫瘤轉移是惡性腫瘤的標志性生物學特征，也是惡性腫瘤相關死亡的首要原因。其中新生血管形成是腫瘤生長和轉移的前提，血管的形成不僅為腫瘤生長提供了營養(yǎng)支持，同時也為腫瘤細胞進入循環(huán)系統(tǒng)提供主要途徑。目前為止，關于乳腺癌的血行轉移機制尚不清楚。進一步研究乳腺癌的血行轉移機制，有效抑制腫瘤血管形成，可能會延長病人的生存期，降低病人的死亡率，為乳腺癌的治療提供新的途徑。 近來有研究顯示：環(huán)氧化酶-2(COX-2)與血管生成密

2、切相關。其高表達可促進腫瘤細胞釋放血管源性物質，對調節(jié)腫瘤新生血管的形成有重要的作用，但其發(fā)生機制尚不清楚。血管內皮生長因子(VEGF)是目前已知的最強的促腫瘤血管生成因子其能特異地作用于血管內皮細胞，在體內誘導血管形成。CD105(Endoglin)是一種與增生有關的內皮細胞的細胞膜抗原。其表達與細胞周期有關，能準確反映內皮細胞的增殖狀態(tài)，目前被認為是一種非常好的檢測內皮細胞的指示劑。有學者報導：COX-2可能通過上調VEGF的表達，

3、促進腫瘤微血管的形成。但有關COX-2、VEGF在乳腺癌組織中的表達與腫瘤微血管密度的關系國內外鮮有報導。 本研究采用免疫組化S-P法對乳腺癌組織COX-2、VEGF、CD105表達情況進行了檢測，并且對其表達情況與疾病的病理生物學特征、患者的生存時間進行了分析，以判斷其對預后的意義。 實驗方法: 1、病例與標本收集了本院外科1999年至2006年間行改良根治術及保乳術治療的乳腺癌患者117例，發(fā)病年齡范圍29～

4、74歲，平均年齡51.4歲。所有患者術前未經任何抗癌治療且術后均在該科接受化療，隨訪資料完整。隨訪期限從4個月至70個月不等，平均隨訪日期為42.3個月。 2、試劑 兔抗人COX-2單克隆抗體、鼠抗人VEGF單克隆抗體、鼠抗人CD105單克隆抗體、SP試劑盒、DAB顯色液，均購于福州邁新生物技術開發(fā)公司。二抗購于北京中杉公司。 3、方法 采用S-P法進行免疫組化測定，實驗步驟嚴格按照說明書進行操作，并用P

5、BS代替一抗作陰性對照，用已知的結、直腸癌COX-2、VEGF陽性片作陽性對照。 4、結果判定 CD105標記的MVD計數以呈現(xiàn)棕色單個皮細胞或內皮細胞群者，只要他們和鄰近的微血管、腫瘤細胞或其它結締組織分開，就把它們作為一個微血管。200×光鏡下計數微血管的個數，取其平均值為微血管密度。COX-2、VEGF的判定以細胞漿和核膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，以陽性細胞百分比與著色強度乘積值分為低表達、中度表達和高表達。陽性率以“

6、中度+高度表達”計，陰性率以“低度表達”計。 5、統(tǒng)計分析方法 所得數據均值比較用t檢驗；生存率采用Kaplan-Meier法計算；生存期差別的比較用Log-Rank時序檢驗：兩樣本率的比較用x2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。所有統(tǒng)計均在SPSS11.5統(tǒng)計軟件包進行。 實驗結果: 1、乳腺癌組織中COX-2、VEGF的表達及與臨床病理聯(lián)系:COX-2的陽性表達率為55.6％，其陽性表達在不同的

7、臨床分期(P=0.01、r=0.238)、淋巴結轉移(P=0.01、r=0.238)、HER-2(P=0.025、r=0.218)、ER(P=0.026、r=-0.205)狀態(tài)，有顯著性差異，而與年齡、腫塊大小、病理類型無顯著性差異。VEGF的陽性表達率為66.7％，與淋巴結轉移、臨床分期有關。 2、CD105標記MVD的表達情況及與COX-2、VEGF的關系:以CD105為新生血管標記物測得的乳腺癌MVD值與患者的腫塊大小、激

8、素受體狀況無關，而與淋巴結轉移、TNM分期有關。并且其與COX-2及VEGF的陽性表達均呈正相關(P=0.029、r=0.201)(P=0.023、r=0.210)。 3、乳腺癌復發(fā)與COX-2和VEGF表達的關系:回顧術后乳腺癌復發(fā)患者的手術標本，其中COX-2、VEGF的陽性表達率較高，為(79.31％、86.21％)明顯高于未復發(fā)組(47.73％％、60.23％)(P=0.003、P=0.01)。 4、COX-2、

9、VEGF表達與術后生存的關系:經Kaplan-Meier生存曲線分析及Log-Rank時序檢驗可以看出COX-2與VEGF表達與無病生存率負相關(P=0.004、P=0.032)。且通過共檢驗得出二者共陽性組生存期最短(P=0.005). 5、多因素分析結果顯示：ER、PR、HER-2陽性表達及腫塊大小、淋巴結轉移情況以及COX-2陽性表達是乳腺癌的獨立預后因素。 結論: 1、乳腺癌組織中COX-2、VEGF均有