高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證患者血清雙向凝膠電泳圖譜建立及質(zhì)譜分析.pdf

1、目的 利用雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)分離高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證、高血壓病肝陽(yáng)上亢證及健康對(duì)照血清總蛋白，建立高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證、高血壓病肝陽(yáng)上亢證及健康對(duì)照血清蛋白質(zhì)組表達(dá)圖譜。比較3組血清蛋白質(zhì)組的差異表達(dá)，對(duì)差異表達(dá)的蛋白質(zhì)進(jìn)行質(zhì)譜分析和數(shù)據(jù)庫(kù)搜索，初步確定高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證血清中差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，為進(jìn)一步闡明中醫(yī)肝陽(yáng)化風(fēng)證的本質(zhì)奠定基礎(chǔ)。 方法 高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證組、高血壓病肝陽(yáng)上亢證組及健康對(duì)照組血清均以試劑

2、盒去除白蛋白及IgG，以BCA法測(cè)血清蛋白濃度。以雙向凝膠電泳分離各組血清蛋白質(zhì)，考馬斯亮藍(lán)染色使凝膠中的蛋白質(zhì)點(diǎn)可視化。掃描凝膠成像，以PDQuest軟件對(duì)高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證、高血壓病肝陽(yáng)上亢證及健康對(duì)照血清蛋白質(zhì)組表達(dá)圖譜進(jìn)行差異分析，選定差異點(diǎn)進(jìn)行MALDI-TOF質(zhì)譜分析。Mascot 軟件搜索 MSDB 和SMISS-PROT數(shù)據(jù)庫(kù)鑒定蛋白質(zhì)。 結(jié)果 1．建立高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證、高血壓病肝陽(yáng)上亢證及健康

3、對(duì)照血清蛋白質(zhì)組表達(dá)圖譜。 2.發(fā)現(xiàn)8個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)在高血壓腦出血肝陽(yáng)化風(fēng)證血清中出現(xiàn)異常表達(dá)，7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)在高血壓病肝陽(yáng)上亢證血清中出現(xiàn)異常表達(dá)。初步鑒定其中的5個(gè)蛋白質(zhì)：血清淀粉樣前體蛋白(serum amyloidprotein precursor)，銅藍(lán)蛋白(ceruloplasmin)，維生素D結(jié)合蛋白(Ⅵtamin D-Binding Protein)，載脂蛋白C-Ⅲ(apolipoprotein C-Ⅲ)和轉(zhuǎn)鐵蛋白(t