激素耐藥型與激素敏感型腎病綜合征兒童尿液雙向電泳圖譜分析.pdf

1、目的:建立激素耐藥型原發(fā)性腎病綜合征(SRNS)兒童、激素敏感型原發(fā)性腎病綜合征(SSNS)兒童與正常兒童尿液全蛋白雙向凝膠電泳圖譜,分析差異的蛋白質位點,為研究原發(fā)性腎病綜合征糖皮質激素耐藥的機制提供依據(jù)。 方法:研究對象共20例,其中SSNS(治療前)5例、SSNS(治療后)5例、SRNS 5例、正常對照組5例,提取各組尿液全蛋白,利用雙向凝膠電泳技術(2-DE),建立尿液全蛋白凝膠圖譜。應用投射掃描儀對染色后的膠圖進行掃描

2、,利用Image Master 2D V3.01分析軟件進行凝膠圖像分析。 結果:測得SRNS組尿液2.DE凝膠的平均檢測點為206+8個,SSNS組(治療前)組尿液2.DE凝膠的平均檢測點是204+5個,SSNS組(治療后)尿液2-DE凝膠的平均檢測點是55+5個,正常對照組凝膠的平均檢測點是105+7個。SRNS組與SSNS組(治療前)尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質點66個,其中4個蛋白質點表達上調、11個蛋白質點表達

3、下調、51個蛋白質點表達"全"或"無";SRNS組與SSNS組(治療后)尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質點33個,其中2個蛋白質點表達下調、31個蛋白質點表達"全"或"無";SSNS組(治療前)與SSNS組(治療后)尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質點65個,均表達"全"或"無";SSNS組(治療后)與正常對照組尿液2-DE凝膠共篩選出差異蛋白質點75個,其中1個蛋白質點表達上調、13個蛋白質點表達下調、61個蛋白質點表達“全”或“無

4、”。 結論：本研究成功建立了分辨率高且重復性較好的SRNS兒童、SSNS兒童及正常兒童尿液全蛋白的2一DE圖譜；通過各組問尿液2-DE圖譜分析，獲得了一些有價值的信息，包括：①SRNS與SSNS患兒的尿液蛋白譜之間存在量與質的差異；②發(fā)現(xiàn)了一些可能與INS激素耐藥有關的差異蛋白位點；③發(fā)現(xiàn)了一些與INS激素敏感有關的蛋白質位點。本研究結果為進一步運用蛋白質組質譜技術從這些差異蛋白質位點中尋找與INS激素耐藥抑或激素敏感相關的蛋白