廣西青錢柳降血糖有效成分及作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的本研究通過提取分離青錢柳多糖成分(Cyclocarya paliurus polysaccharide,CP),觀察CP對實(shí)驗(yàn)性糖尿病小鼠的降糖作用,并初步探討其降糖機(jī)制,為開發(fā)一種有效而低毒的降糖藥物提供理論依據(jù)。
　　方法通過水提醇沉淀的方法提取CP,用Molish反應(yīng)及Fehling反應(yīng)來鑒定CP。采用四氧嘧啶(alloxan,ALX)致糖尿病小鼠模型方法研究CP降低高血糖的作用。100只清潔級昆明小鼠隨機(jī)抽取12只為正

2、常對照組,尾靜脈注射等滲鹽水(0.1ml·10g-1);余小鼠注射ALX(70mg·kg-1),3天后測定其空腹血糖值,將>11.1mmol·L-1的小鼠作為糖尿病模型小鼠。然后將糖尿病模型小鼠隨機(jī)分成5組分別為:模型組、二甲雙胍組(Dimethyldiguanide, Dim;250mg·kg-1·d-1)、CP低、中、高劑量組(CP300mg、450mg和600mg·kg-1)。給予CP及陽性對照藥物,每天上午一次,連續(xù)15天。實(shí)驗(yàn)

3、期間觀察并記錄小鼠飲食、飲水、體重、大小便等一般情況,并在相應(yīng)時(shí)間內(nèi)尾靜脈采血測定各組小鼠的空腹血糖(FBG)、體重;給藥結(jié)束后,取胰腺組織進(jìn)行HE染色觀察。采用組織勻漿MDA比色法和Fenton反應(yīng),進(jìn)行青錢柳多糖的抗氧化及脂質(zhì)過氧化作用的研究,探討青錢柳多糖降血糖的作用機(jī)制。
　　結(jié)果1、青錢柳葉經(jīng)水提醇沉淀的方法提取得到土黃色固體;用Molish及 Fehling反應(yīng)對該樣品進(jìn)行鑒定,反應(yīng)結(jié)果均為陽性證實(shí)該樣品為 CP。CP

4、能夠拮抗ALX誘導(dǎo)的小鼠高血糖,給藥15天后,各給藥組血糖與模型組相比,均有明顯降低(P<0.05)。CP對正常小鼠血糖及體重不產(chǎn)生影響。給藥完畢后,剖取胰腺HE染色觀察發(fā)現(xiàn),CP對四氧嘧啶導(dǎo)致的胰島細(xì)胞損傷,具有一定的保護(hù)或修復(fù)作用。模型組胰島細(xì)胞結(jié)構(gòu)較正常胰島組織可見到明顯的破壞,各給藥組小鼠的胰島細(xì)胞形態(tài)及結(jié)構(gòu)比較接近正常組的,壞死細(xì)胞及炎細(xì)胞出現(xiàn)的較少,相對于模型組的損傷較輕。
　　2、通過對CP抗氧化方面的研究發(fā)現(xiàn),它具

5、有較強(qiáng)的抗脂質(zhì)過氧化及清除羥自由基的作用。CP對小鼠肝組織自發(fā)性MDA的有較強(qiáng)的抑制作用,抑制率最高達(dá)40.4％;CP還可明顯減輕由CCl4、H2O2、Fe2+-VitC等自由基誘導(dǎo)的肝臟脂質(zhì)過氧化作用,最高抑制率分別可達(dá)47.14%、50.07%、41.01%。在以上反應(yīng)中,當(dāng)CP濃度小于2 mg·ml-1時(shí),隨著CP劑量的增高,抑制率也相應(yīng)的增高,呈劑量依耐性;當(dāng)濃度達(dá)到4mg·ml-1時(shí),抑制率并沒有持續(xù)增高但仍處于較高水平。CP