薰衣草有效成分的抗腫瘤作用及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察薰衣草有效成分對(duì)小鼠移植性實(shí)體瘤H22的影響及對(duì)HepG-2的作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：以不同濃度的19-羥基烏蘇酯處理HepG-2細(xì)胞，應(yīng)用MTT法測(cè)定其抗增殖作用、測(cè)定培養(yǎng)上清液的LDH比活性、HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化、用DNA瓊脂糖凝膠電泳法檢測(cè)凋亡、Annexin-V/PI雙染法測(cè)定凋亡率、western blot檢測(cè)Bax和Bcl-2的蛋白表達(dá)、測(cè)定含19-羥基烏蘇酯的血清對(duì)HepG-2的抗增

2、殖作用。將H22瘤株接種于小鼠，制備移植性實(shí)體瘤模型，計(jì)算腫瘤抑制率、胸腺及脾臟指數(shù)；采用雙抗體夾心ELISA法檢測(cè)荷瘤小鼠血清腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-6(IL-6)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的水平；測(cè)定白細(xì)胞數(shù)。分別用瓊脂糖凝膠電泳法、western blot檢測(cè)了荷瘤小鼠H22腫瘤組織的凋亡及Bax、Bcl-2的蛋白的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：19-羥基烏蘇酯對(duì)HepG-2有明顯的體外抗增殖作用，當(dāng)濃度為6.2

3、5μg/mL作用時(shí)間24h時(shí)，抑制率為46.2％，接近IC50；藥物處理后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞體積變小，細(xì)胞核深染；25.00、12.50、6.25和3.13μg/mL的19-羥基烏蘇酯對(duì)HepG-2作用24h的LDH比活性分別為1576.89、1561.61、1884.406和1411.12 U/gprot；DNA Ladder法可觀測(cè)到明顯的凋亡條帶；流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定12.50、6.25和3.13μg/mL的19-羥基烏蘇酯對(duì)HepG-2作用24

4、h的早期凋亡率分別為10.20%、10.85%和32.89%；19-羥基烏蘇酯的含藥血清對(duì)HepG-2細(xì)胞也有體外抗增殖作用。Western blot法檢測(cè)19-羥基烏蘇酯可以上調(diào)Bax蛋白表達(dá)、下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)。不同劑量的薰衣草乙醇提取物的抑瘤率均高于21%，顯著提高胸腺指數(shù)，提高血清中TNF-α和IL-6的水平，降低實(shí)體瘤組織VEGF的水平；薰衣草乙醇提取物用藥組的白細(xì)胞數(shù)與正常組比較無明顯差異，顯著高于陽(yáng)性對(duì)照組。DNA L