氨氯地平聯合5-fu對小鼠肝癌H22體內體外作用的實驗研究.pdf

1、近年來，鈣通道阻滯劑（CCB）與化療藥物聯合應用的研究日益增多。大量的研究表明，抗癌藥物與CCB聯合可以增強抗癌藥物對多系統(tǒng)腫瘤細胞的細胞毒作用，對多藥耐藥腫瘤細胞可致耐藥逆轉。我們前期的研究表明，與其他的鈣通道阻滯劑相比氨氯地平具有良好的抗腫瘤細胞增殖的潛能。本研究采用體外細胞培養(yǎng)法與體內移植性腫瘤觀察氨氯地平與5-Fu聯合應用對小鼠肝癌H22的作用，以期將氨氯地平作為一種化療增敏劑用于肝癌的臨床治療。 目的：初步研究氨氯地平

2、（amlodipine）聯合5-Fu對小鼠腹水型肝癌細胞株H22的聯合抑制效應以及兩藥對小鼠H22肝癌腹水瘤及實體瘤的抑瘤效應。 方法：采用小鼠腹水型肝癌細胞株H22，經氨氯地平（3.125～50μmol/L）及5-Fu（12.5～200μg/mL）單獨及聯合作用24、48、72小時后，采用MTT法檢測藥物對H22細胞生長的抑制作用，計算兩藥的中效濃度（IC50）及合用指數CI；流式細胞儀（FCM）檢測藥物單獨及聯合作用18h后

3、的凋亡情況以及藥物作用48h后的細胞周期分布；免疫細胞化學法檢測藥物單獨及聯合作用48h后H22細胞Bcl-2、Bax的表達情況。將昆明種小鼠右腋皮下及腹腔接種H22肝癌細胞建立小鼠移植腫瘤模型后，隨機將小鼠分為四組：生理鹽水組（對照組），氨氯地平組（10mg·10g-1·d-1），5-Fu組（第3，6，9天腹腔注射5-Fu溶液，10mg·10g-1·d-1）和氨氯地平+5-Fu組（氨氯地平灌胃給藥10mg·10g-1·d-1，第3，6

4、，9天腹腔注射5-Fu溶液，10mg·10g-1·d-1），連續(xù)10d，觀察移植瘤體重量、腹水瘤小鼠生存時間，計算抑瘤率以及生命延長率。 結果： （1）氨氯地平、5-Fu單獨及聯合作用對小鼠肝癌細胞的生長均有顯著的增殖抑制作用，并呈明顯的劑量和時間依賴性；兩藥聯合應用時，當藥物效應（抑制率）小于95％時，具有協(xié)同作用（CI<1）。 （2）流式細胞檢測結果顯示氨氯地平、5-Fu單獨及聯合作用均可誘導H22細胞凋亡，

5、與對照組比較，各實驗組細胞凋亡率明顯增加，合用組與單用組比較，凋亡率明顯增加。 （3）流式細胞檢測結果顯示氨氯地平單獨作用能阻滯H22細胞于G0/G1期，5-Fu單獨作用可阻滯H22細胞于S期，兩藥聯用能阻滯H22細胞于G0/G1期和S期。 （4）氨氯地平，5-Fu均能下調Bcl-2的表達，上調Bax的表達，聯合作用對Bcl-2、Bax的表達影響更明顯。 （5）氨氯地平組，5-Fu組和氨氯地平+5-Fu組對H22

6、小鼠肝癌實體瘤抑瘤率分別為35.98％，67.95％，80.68％；對H22肝癌腹水瘤小鼠生命延長率分別為19.94％，24.08％，43.11％。 結論： （1）氨氯地平與5-Fu均可抑制小鼠肝癌H22細胞的增殖，當兩藥合用時能顯著增加單藥對H22細胞的抑制作用，提示兩藥聯合應用對抑制H22細胞生長有較好的協(xié)同作用。 （2）5-Fu單獨作用可阻滯H22細胞于S期；氨氯地平阻滯H22細胞周期于G1期；兩藥合用通過