慢性乙肝、肝硬化患者CXCL6及其受體CXCR1、CXCR2的表達.pdf

1、目的:研究慢性乙型肝炎、肝硬化患者外周血和肝活檢組織中CXCL6及其受體CXCR1、CXCR2的表達，檢測外周血及肝活檢組織中CXCL6、CXCR1、CXCR2mRNA含量，分析其與HBV-DNA載量、AST、ALT水平之間的相互關(guān)系，探討CXCL6、CXCR1、CXCR2在HBV感染后致慢性肝炎、肝硬化分子機制中的作用。
　　方法:篩選典型HBV感染后慢性肝炎患者37例，肝硬化患者17例，正常獻血員對照21例，以ELISA法檢測

2、血清CXCL6水平;RT-PCR檢測慢性乙肝患者外周血及肝活檢組織中CXCL6、CXCR1、CXCR2mRNA含量，lgcDNA/lgGAPDH代表其最終mRNA水平。篩選慢性肝炎患者9例，肝硬化患者14例（代償期9例，失代償期5例），肝癌患者12例，肝外傷、膽囊手術(shù)切除的正常肝組織17例，以SP免疫組化染色觀察肝活檢組織中CXCL6、CXCR1、CXCR2的表達。
　　結(jié)果:慢性乙肝和肝硬化患者血清CXCL6水平分別為（673.

3、11±199.57）pg/mL，（736.59±181.87）pg/mL，與正常對照組相比差異具有顯著性意義(P＜0.01)。HBV-DNA(+)和HBV-DNA(-)組血清CXCL6水平分別為（810.40±170.45）pg/mL，（546.46±101.83）pg/mL，兩者相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。慢性乙肝和肝硬化患者外周血中CXCL6mRNA的表達分別為（0.616±0.279）lgcDNA/lgGAPDH和(0

4、.871±0.209)lgcDNA/lgGAPDH，與對照相比，P＜0.01，差異具有顯著性。CXCL6mRNA的表達與乙肝病毒載量有關(guān)，HBV-DNA(+)者((0.774±0.276)lgcDNA/lgGAPDH）較HBV-DNA(-)者((0.629±0.257)lgcDNA/lgGAPDH)高，P=0.0329，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。肝硬化患者CXCL6mRNA的表達高于慢性乙肝患者，P=0.0015，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。慢性乙肝

5、和肝硬化外周血CXCR1mRNA水平分別為（0.770±0.219）lgcDNA/lgGAPDH和（0.808±0.299）lgcDNA/lgGAPDH，與對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。慢性乙肝組、肝硬化組、HBV-DNA(+)組與HBV-DNA(-)組各組間相比，差異無顯著性意義(P＞0.05)。慢性乙肝和肝硬化患者CXCR2mRNA的表達與對照組相比，P＞0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。慢性乙肝患者血清ALT、AST水平

6、分別為（63.17±21.46）U/L、(54.78±26.15)U/L，肝硬化患者ALT、AST水平分別為（69.44±24.51）U/L、(72.19±22.64)U/L。相關(guān)性分析結(jié)果顯示:慢性乙肝和肝硬化患者HBV-DNA載量與血清CXCL6水平(r=0.774)、外周血CXCL6mRNA含量(r=0.558)及外周血CXCR1mRNA含量(r=0.627)在0.01水平上顯著相關(guān)，與CXCR2mRNA含量(r=0.315)在0

7、.05水平上顯著相關(guān)。慢性乙肝和肝硬化患者血清ALT、AST水平與血清CXCL6水平(r=0.757，r=0.745)、外周血CXCL6mRNA含量(r=0.577，r=0.565)及CXCR1mRNA含量(r=0.633，r=0.637)在0.01水平上顯著相關(guān)，與CXCR2mRNA含量(r=0.256，r=0.250)無明顯相關(guān)性。SP免疫組化顯示:慢性肝炎患者CXCL6表達陽性率為76.47％;肝硬化患者CXCL6表達陽性率為78

8、.57％;肝癌患者CXCL6表達陽性率為83.33％;而正常對照中其陽性率為11.76％。慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者CXCL6表達陽性率顯著高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。慢性肝炎患者CXCR1表達陽性率為82.35％;肝硬化患者CXCR1表達陽性率為85.71％;肝癌患者CXCR1表達陽性率為91.67％;而正常對照CXCR1表達陽性率為23.53％。慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者CXCR1表達陽性率顯著高于對照組，差異具

9、有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。慢性肝炎患者CXCR2表達陽性率為52.94％;肝硬化患者中CXCR2表達50％;肝癌患者CXCR2表達陽性率為58.33％;正常對照CXCR2表達陽性率為58.82％。慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者CXCR2表達陽性率與對照組無明顯差異(P＞0.05)。肝組織RT-PCR顯示:慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者肝組織CXCL6mRNA表達水平為分別為(0.675±0.282)lgcDNA/lgGAPDH，(0.883

10、±0.230)lgcDNA/lgGAPDH和（1.055±0.175）lgcDNA/lgGAPDH，與對照組相比，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.01)。肝癌患者CXCL6mRNA表達水平明顯高于肝硬化組和慢性肝炎組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者肝組織CXCR1mRNA表達水平分別為(0.685±0.160)lgcDNA/lgGAPDH，（0.854±0.232）lgcDNA/lgGAPDH，（1.050

11、±0.183）lgcDNA/lgGAPDH，與對照組相比，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。肝癌患者CXCR1mRNA表達水平明顯高于肝硬化組和慢性肝炎組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。慢性乙肝、肝硬化、肝癌患者肝組織CXCR2mRNA表達水平分別為(0.481±0.159)lgcDNA/lgGAPDH，(0.502±0.116)lgcDNA/lgGAPDH和（0.490±0.144）lgcDNA/lgGAPDH與對照組相比，

12、差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　結(jié)論:慢性乙肝、肝硬化患者血漿CXCL6水平升高，其全血及肝組織中CXCL6mRNA、CXCR1mRNA表達升高，外周血CXCL6、CXCR1及其mRNA的表達與患者血清HBV-DNA載量及ALT、AST水平呈正相關(guān)，慢性乙肝、肝硬化患者CXCR2的表達水平與正常對照組無明顯差異，提示CXCL6和CXCR1可能與慢性肝炎的發(fā)生發(fā)展有關(guān)，而CXCR2與慢性乙肝發(fā)生發(fā)展的聯(lián)系較弱。CXCL6及C