三氯乙烯藥疹樣皮炎患者CXCR2基因表達(dá)水平研究.pdf

1、職業(yè)性三氯乙烯藥疹樣皮炎是一種發(fā)病較為迅猛的職業(yè)病。多為接觸三氯乙烯一段時(shí)間后發(fā)病，臨床表現(xiàn)一般為先發(fā)熱，后出皮疹，并伴隨有一定的肝、腎損傷，重癥患者甚至出現(xiàn)肝、腎等器官的功能衰竭。每年都有相當(dāng)數(shù)量的新接觸該行業(yè)的工人發(fā)病，給經(jīng)濟(jì)發(fā)展和社會(huì)穩(wěn)定帶來(lái)了不利因素。 現(xiàn)階段，國(guó)內(nèi)外對(duì)該疾病的研究還處在臨床經(jīng)驗(yàn)、血清學(xué)和細(xì)胞形態(tài)學(xué)階段，分子生物學(xué)研究也剛剛起步，對(duì)該疾病的發(fā)病機(jī)制和機(jī)理尚未明確。現(xiàn)階段認(rèn)為是一種變態(tài)性的炎癥反應(yīng)，在分子方

2、面可以從研究趨化因子受體基因的表達(dá)水平入手，對(duì)該疾病的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步的研究和探討，為從根本上預(yù)防和治療這種職業(yè)病提供理論依據(jù)，同時(shí)也為職業(yè)病研究領(lǐng)域提供新的方法和思路。 本研究的內(nèi)容之一是皮炎類(lèi)疾病微量血樣取樣方法的建立。以前對(duì)皮炎患者的采樣主要以取表皮和真皮組織為主，一方面對(duì)患者身心造成了損傷，使他們對(duì)采樣產(chǎn)生抵觸情緒，增加了取樣難度。另一方面，組織采樣的操作流程繁瑣，樣本不易保存，研磨后RNA降解嚴(yán)重，不利于下步反轉(zhuǎn)錄操

3、作的進(jìn)行。本研究選取血液作為新的皮炎患者的樣本，探討從1ml新鮮血液中一步提取RNA的實(shí)驗(yàn)方法，并對(duì)RNA結(jié)果進(jìn)行檢測(cè)和RT-PCR。實(shí)驗(yàn)證明可以用血液代替組織在皮炎疾病方面進(jìn)行分子水平檢測(cè)，同時(shí)降低了患者采樣的難度。因而能最大程度的擴(kuò)大取樣范圍，也為皮炎類(lèi)疾病分子生物學(xué)研究建`立了新的方法。內(nèi)容之二是通過(guò)對(duì)職業(yè)性三氯乙烯藥疹樣皮炎患者外周血趨化因子受體基因(CXCR2)表達(dá)水平的研究，對(duì)該疾病的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行進(jìn)一步的探討。通過(guò)半定量即R

4、T-PCR的實(shí)驗(yàn)方法對(duì)患者、接觸者和正常對(duì)照組的CXCR2基因表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè)，并分組對(duì)病例-對(duì)照組和接觸-對(duì)照組進(jìn)行對(duì)照分析。 病例-對(duì)照組分析結(jié)果表明：CXCR2基因在兩組中的表達(dá)水平存在明顯差異，t=3.92，P=0.001<0.05，可以認(rèn)為病例和對(duì)照組中，該基因的表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從以上結(jié)果可以得出，在三氯乙烯藥疹樣皮炎患者外周血中，趨化因子受體基因的表達(dá)是明顯上調(diào)的，其表達(dá)水平是正常人群的2.345倍。這也說(shuō)明

5、，該基因在疾病的發(fā)病過(guò)程中起了非常重要的作用，通過(guò)異常趨化炎癥細(xì)胞到表皮發(fā)生反應(yīng)，進(jìn)而導(dǎo)致了機(jī)體損傷和疾病的發(fā)生。 接觸-對(duì)照組分析結(jié)果表明：CXCR2基因在接觸中的表達(dá)水平與正常人群相比顯著降低，t=0.419，P=0.001<0.05，說(shuō)明接觸組和對(duì)照組的基因表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果提示：CXCR2在接觸三氯乙烯但不發(fā)病的人群中低表達(dá)，可能使其趨化因子IL-8的信號(hào)傳遞通路受阻，產(chǎn)生了疾病的易感性差異。 但是現(xiàn)階