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1、目的:探討針刺頭部腧穴對(duì)實(shí)驗(yàn)性腦出血大鼠繼發(fā)性損傷神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制。 方法:選取健康雄性Wistar大鼠160只,先隨機(jī)分為三個(gè)組:模型對(duì)照組(簡(jiǎn)稱模型組),模型十針刺組(簡(jiǎn)稱針刺組),模型十腦復(fù)康組(簡(jiǎn)稱腦復(fù)康組),每組5 O只大鼠,每組又分為術(shù)后6h、1d、2d、3d、7d五個(gè)時(shí)相點(diǎn),每個(gè)時(shí)相點(diǎn)10只大鼠,制備腦出血模型,另設(shè)10只正常大鼠作為空白對(duì)照組(簡(jiǎn)稱正常組)。針刺組針刺患側(cè)百會(huì)透曲鬢穴,應(yīng)用神經(jīng)行為學(xué)指標(biāo)觀察各組
2、大鼠神經(jīng)功能缺損程度,在光鏡及電鏡下觀察各組大鼠腦組織形態(tài)學(xué)改變;運(yùn)用免疫組化及原位雜交的檢測(cè)方法,觀察不同時(shí)相點(diǎn)針刺頭部腧穴對(duì)腦出血大鼠血腫周圍腦組織IL-1B、NGF mRNA及蛋白表達(dá)的影響;運(yùn)用TUNEL檢測(cè)方法,觀察不同時(shí)相點(diǎn)針刺頭部腧穴對(duì)腦出血周圍組織神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果: 1.模型組大鼠出現(xiàn)不同程度神經(jīng)功能缺損表現(xiàn),3d 左右神經(jīng)功能缺損最嚴(yán)重,針刺組在相同時(shí)相點(diǎn)神經(jīng)功能缺損較模型組減輕,兩者比較差異
3、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。針刺組與腦復(fù)康組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 2.光鏡下可見(jiàn)模型組血腫周圍腦組織壞死、水腫,神經(jīng)細(xì)胞核固縮、空泡化以及周圍炎細(xì)胞浸潤(rùn),以3d時(shí)最嚴(yán)重。針刺組較模型組細(xì)胞排列規(guī)整,水腫程度減輕,炎性細(xì)胞減少。腦復(fù)康組較模型組改變不顯著。 3.電鏡下可見(jiàn)模型組神經(jīng)細(xì)胞腫脹,染色質(zhì)凝聚成塊狀或核成溶解狀,線粒體腫脹呈空泡狀,嵴斷裂,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,多聚核糖體解聚,突觸結(jié)構(gòu)腫脹。針刺組較模型組神經(jīng)細(xì)胞腫脹減輕,線粒體結(jié)
4、構(gòu)破壞較輕,突觸結(jié)構(gòu)較清晰。腦復(fù)康組較模型組改變不顯著。 4.IL-1β免疫組化和原位雜交方法檢測(cè)結(jié)果:模型組及針刺組大鼠血腫周圍腦組織IL-1β的表達(dá)隨不同時(shí)相點(diǎn)的變化而逐漸增加,至3d時(shí)達(dá)高峰,7d時(shí)有所下降。在相同時(shí)相點(diǎn),針刺組與模型組比較,IL-1β表達(dá)均明顯低于模型組,兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。針刺組與腦復(fù)康組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.運(yùn)用TUNEL法檢測(cè)模型組及針刺組大鼠血腫周圍腦組織中神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)隨不
5、同時(shí)相點(diǎn)變化而逐漸增加,至3 d時(shí)達(dá)高峰,7d時(shí)有所下降。在相同時(shí)相點(diǎn),針刺組與模型組比較,TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯低于模型組。兩者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。針刺組與腦復(fù)康組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 6.NGF免疫組化和原位雜交方法檢測(cè)結(jié)果:針刺組大鼠血腫周圍腦組織NGF的表達(dá)隨不同時(shí)相點(diǎn)的變化而逐漸增加,至7d時(shí)達(dá)高峰,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。針刺組與腦復(fù)康組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: 1.針刺頭部腧穴
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