聚乳酸乳牙根管樁的生物相容性及臨床應用的實驗研究.pdf

1、嚴重嬰幼兒齲造成的殘根殘冠修復治療目前仍是臨床治療難題。恒牙殘根殘冠的治療通常應用金屬或纖維樁（核）利用根管增強固位，以恢復牙體的形態(tài)和功能，但由于不能吸收，用于乳牙殘根殘冠的修復則會影響乳恒牙的替換。乳恒牙替換是兒童時期發(fā)生一種的特殊生理現(xiàn)象，隨著恒牙胚的發(fā)育，乳牙到一定時期牙根會逐漸吸收，由萌出的恒牙所代替。由于乳恒牙替換，在嚴重齲蝕乳牙的根管內(nèi)固定修復治療時必須要考慮到是否對恒牙的萌出造成影響。國內(nèi)文獻顯示大多數(shù)乳牙殘根殘冠通常選

2、擇對癥治療或拔除，但是保守治療不僅影響患兒美觀和發(fā)育，更嚴重的是影響后繼恒牙的正常萌出和頜骨的生長發(fā)育，成為錯頜畸形的發(fā)生誘因。為解決這一問題，選擇合適的根管內(nèi)固定裝置對嚴重齲壞乳牙進行形態(tài)、功能以及符合生理特點的修復是兒童口腔科醫(yī)生需要解決的重要課題。近來醫(yī)用生物可吸收材料開始應用于臨床治療，如骨科的固定裝置及外科的支架材料。生物可吸收材料具有良好的組織相容性、一定的可塑性和機械性能、適當?shù)纳锟山到庑阅?，用于治療或替換人體的組織和器

3、官，增強功能或促進愈合。而聚乳酸因為具備優(yōu)良的理化及生物學性能而成為研究最多的材料。本實驗通過對原創(chuàng)性的聚乳酸可吸收根管樁進行細胞生物學相容性實驗及動物模型實驗探討乳牙專用可吸收根管樁的應用可行性，進而通過對其臨床應用于嬰幼兒齲患兒進行觀察和評估，探討乳牙殘根殘冠功能修復的臨床療效，為嬰幼兒齲的治療提供一種新的治療方法，為規(guī)范可吸收根管樁的臨床應用奠定一定的實驗基礎。
　　實驗一聚乳酸根管樁生物相容性的基礎實驗研究
　　本實

4、驗首先利用聚乳酸材料制作生物可吸收根管樁，進而制備不同濃度聚乳酸根管樁的浸提液。體外分離和培養(yǎng)與乳恒牙替換生理過程密切相關(guān)的牙囊細胞、乳牙牙周膜細胞及乳牙牙髓細胞，并采用免疫組化方法初步鑒定細胞。進而通過將相應濃度聚乳酸根管樁浸提液加入３種細胞的培養(yǎng)基孵育一定時間，采用組織學方法、MTT分析、流式細胞技術(shù)觀察和檢測牙囊細胞、乳牙牙周膜細胞、乳牙牙髓細胞的形態(tài)學變化，細胞毒性反應及凋亡。實驗結(jié)果顯示：加入聚乳酸根管樁浸提液的實驗組與陰性對

5、照比較，細胞形態(tài)未見明顯異常，生長情況良好；細胞毒性評估顯示實驗組各濃度組的細胞毒性級別均為1級，與陰性對照組無顯著差異；流式細胞分析結(jié)果顯示實驗組早期凋亡和晚期凋亡，凋亡指數(shù)與陰性對照組之間無明顯差別。其次利用不同濃度的聚乳酸根管樁浸提液，注射隨機分組的昆明小鼠腹腔內(nèi)，同時設置生理鹽水注射的動物為對照組。觀察和記錄小鼠的急性毒性行為反應，進而通過白介素-1（IL-1）定量酶聯(lián)檢測（Elisa）方法分析實驗動物血清中炎性因子活性的變化，

6、此外常規(guī)組織學方法制備小鼠肝臟標本,切片HE染色后觀察肝細胞對聚乳酸材料的毒性反應。結(jié)果顯示：實驗組小鼠均無明顯急性毒性行為反應；血清中炎性分子IL-1活性分析，實驗組與對照組之間無顯著差異；肝臟組織學觀察未見明顯細胞腫脹或壞死、充血、炎細胞浸潤等異常。綜合上述結(jié)果提示，制備的聚乳酸根管樁對人乳恒牙替換相關(guān)細胞的生物學行為無明顯影響，具有良好的生物相容性，對實驗動物無生物毒性作用，符合生物安全性要求，可以用于進一步臨床研究。
　　

7、實驗二聚乳酸根管樁應用的動物實驗研究
　　本實驗以3月齡的幼犬做為實驗動物，利用聚乳酸根管樁，選擇犬乳前牙制備根管內(nèi)固定修復的實驗模型。定期通過詳細口腔檢查，觀察修復后乳牙的牙體和牙周組織的臨床表現(xiàn)以及修復體的情況，放射線檢查牙根尖周組織的變化。2個月后，無痛處死實驗模型動物，切取包含乳牙及恒牙胚的頜骨組織樣本，常規(guī)方法制備標本，組織學切片及HE染色觀察聚乳酸根管樁對乳牙根吸收和繼承恒牙胚萌出的影響，以及乳牙根尖周組織的生物學反應

8、。實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)：以聚乳酸根管樁為內(nèi)固定裝置修復的犬乳前牙，未見明顯病理性牙體松動、牙齦充血、牙周膿腫等臨床異常表現(xiàn)，牙體修復物完好；X線片檢測乳牙根尖周膜腔清晰，未見異常的炎性陰影及病理性吸收，其下方的恒牙胚發(fā)育正常；組織學染色發(fā)現(xiàn)修復乳牙的牙根出現(xiàn)生理性吸收，繼承的恒牙胚逐漸正常萌出，乳恒牙替換的進度與健康對照牙齒無明顯差異，乳牙根尖周組織未見明顯組織結(jié)構(gòu)紊亂、毛細血管充血、炎細胞浸潤、組織壞死等異常病理表現(xiàn)。動物實驗結(jié)果提示聚乳酸根

9、管樁進行內(nèi)固定修復的應用對乳恒牙的生理性替換無明顯影響。
　　實驗三聚乳酸根管樁臨床應用試驗的初步研究
　　本實驗采用SmartPinTM醫(yī)用生物可吸收棒（Linvatec，F(xiàn)inland）作為乳牙修復的臨床試驗材料，它是通過獨特的拉絲編織專利技術(shù)合成出具有高強度和堅韌特點的聚乳酸聚合物。首先將直徑為2mm的Smart Pin TM醫(yī)用生物可吸收棒通過無菌切割方法制備成長度為10mm的根管樁，無菌常溫保存待用。臨床研究對象選

10、擇適應證為上頜乳前牙嚴重齲壞且常規(guī)治療手段無法修復的3～4歲患兒48名，共100個牙齒。在知情同意的前提下，首先通過傳統(tǒng)根管治療方法對殘根殘冠進行治療和處理，而后根管內(nèi)植入和粘結(jié)聚乳酸根管樁，在其基礎上復合樹脂粘結(jié)修復牙冠，完成治療?；純喊肽甓ㄆ趶筒椋ㄟ^臨床檢查方法和利用USPHS&Ryge評估標準，觀察和分析聚乳酸根管樁用于修復乳前牙殘根、殘冠的成功率及修復效果；而采用放射學檢查方法，觀察和分析修復乳牙可能出現(xiàn)的臨床后遺癥或并發(fā)癥（