VEGF和FN與慢性馬兜鈴酸腎病大鼠腎間質(zhì)纖維化的關(guān)系及強的松干預(yù)治療的作用.pdf

1、目的： 1．通過建立慢性馬兜鈴酸腎?。–hronic aristolochic acid nephrology，CAAN）大鼠模型，觀察CAAN大鼠腎臟組織形態(tài)改變。 2．動態(tài)觀察CAAN大鼠腎小管間質(zhì)中血管內(nèi)皮生長因子（Vascular endothelial growth factor，VEGF）、缺氧誘導(dǎo)因子—1α（Hypoxia inducible factor—1α，HIF—1α）和纖維連接蛋白（Fibrone

2、ctin，F(xiàn)N）的表達情況，探討它們與CAAN大鼠腎間質(zhì)纖維化的關(guān)系。 3．觀察強的松對慢性馬兜鈴酸腎病大鼠腎間質(zhì)纖維化的影響 方法： 1．46只Wistar大鼠分3組（對照組＼模型組＼治療組）： ①需藥物處理大鼠（n=34，其中24只作為模型組處死，另外10只作為治療組處死），首先給予關(guān)木通水煎劑連續(xù)灌胃12周建立CAAN大鼠動物模型；之后從模型中隨機選取10只給予強的松10mg/（kg·d）連續(xù)灌胃4

3、周②對照組（n=12），給予等量自來水連續(xù)灌胃12周；在4、8、12、16周末分別處死模型組6只、對照組3只，16周末處死治療組10只，留取腎組織。 2．大鼠腎臟組織常規(guī)HE、Masson染色，光鏡下觀察CAAN組織形態(tài)改變并測定腎間質(zhì)相對面積評價腎間質(zhì)纖維化程度。免疫組化觀察VEGF、HIF—1α、和FN的表達，并行半定量分析檢測表達量。 3．統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS13．0統(tǒng)計軟件。計量資料用x±s表示，組間差異比較

4、采用t檢驗；相關(guān)性檢驗采用Pearson相關(guān)分析。 結(jié)果： 1．大鼠腎組織形態(tài)改變：對照組各大鼠腎小管間質(zhì)基本正常，模型組在4周末，小管上皮細(xì)胞腫脹，個別上皮細(xì)胞壞死脫落，可見核固縮，間質(zhì)少量炎癥細(xì)胞浸潤。8周末，部分腎小管上皮萎縮、扁平、刷狀緣消失，腎間質(zhì)面積增寬，炎癥細(xì)胞小灶狀浸潤。12周末，腎小管多灶狀萎縮或消失，管腔擴大，間質(zhì)明顯纖維化，少量炎癥細(xì)胞浸潤。16周末，腎小管大片萎縮、消失，呈現(xiàn)寡細(xì)胞性腎間質(zhì)纖維化。

5、治療組16周末腎間質(zhì)纖維化相對面積較模型組明顯減小。 2．大鼠腎組織免疫組化染色結(jié)果：對照組在腎小管上皮細(xì)胞及小血管內(nèi)皮細(xì)胞有VEGF表達，HIF—1α在皮髓質(zhì)交界處的腎小管上皮細(xì)胞有少量表達，F(xiàn)N幾乎不見表達，模型組在8周時VEGF表達較對照組明顯增加（P<0．01），之后表達量隨時間的延長而減少，16周時光鏡觀察越是扁平、萎縮、細(xì)胞融合等晚期慢性病變明顯的區(qū)域，表達VEGF陽性顆粒越少；HIF—1α、FN表達在腎小管上皮、間

6、質(zhì)成纖維細(xì)胞和少量浸潤的炎癥細(xì)胞，隨著病變進展，表達量顯著增多（P<0．01），尤其是病變明顯的變性萎縮上皮細(xì)胞陽性顆粒表達更多。治療組與16周末模型組相比，VEGF表達明顯增加（P<0．01），HIF—1α、FN表達明顯減少（P<0．01）。 3．相關(guān)性分析：模型組大鼠腎小管間質(zhì)HIF—1α、FN表達量和腎間質(zhì)相對面積兩兩正相關(guān)：HIF—1α和FN r=0．958，HIF—1α和腎間質(zhì)相對面積r=0．971，F(xiàn)N表達量和腎間質(zhì)