兔眼玻璃體腔注射硫酸異帕米星的眼內安全性研究.pdf

1、目的：目前臨床上常用的治療細菌性眼內炎的方法為玻璃體腔注射萬古霉素聯合頭孢他啶。萬古霉素為臨床上治療細菌性眼內炎的一線用藥，它是一窄譜殺菌抗生素，僅對革蘭陽性菌有強大的殺菌作用，所以常和抗革蘭陰性桿菌的頭孢他啶聯合應用治療眼內炎。近年來細菌抗藥性不斷增加成為臨床治療感染性眼內炎的難題，任喆等研究發(fā)現革蘭陽性球菌對萬古霉素的敏感性有所下降，從100.0％降至84.4％：此外有研究表明萬古霉素對凝固酶陰性的葡萄球菌（表皮葡萄球菌，溶血葡萄球

2、菌，人葡萄球菌等）敏感性降低。2005年我國研究資料顯示耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)的發(fā)生率已達51.3％，而上海更是高達78.4％。表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌耐藥菌株也有迅速增長趨勢并且表現出對萬古霉素的高度多樣性耐藥。這為臨床用藥敲響了警鐘．頭孢他啶是第三代頭孢菌素類抗生素，他與萬古霉素聯合應用主要起抗革蘭陰性菌的作用（銅綠假單胞菌）。頭孢他啶隨著臨床用藥的大劑量，長時間，以及用藥不規(guī)范，革蘭陰性桿菌對頭孢他啶的耐藥性逐年增

3、加：2000年銅綠假單胞菌對頭孢他啶的耐藥率是14％。而戴濱等統(tǒng)計2006年銅綠假單胞菌對頭孢他啶的耐藥性已高達60％。硫酸異帕米星是第三代半合成氨基糖甙類抗生素，具有抗菌譜廣、殺菌活性強、耐藥性低、毒副作用小及良好的抗生素后效應等優(yōu)勢已廣泛用于治療嚴重感染性疾病和混合感染性疾?。畤鴥韧庠S多研究資料顯示異帕米星表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌等多種致病菌的體外抗菌活性較強，而這些正是細菌性眼內炎的主要致病菌。但眼內用藥尚未見報

4、道，本研究希望通過動物實驗觀察硫酸異帕米星玻璃體腔內注藥后的視網膜毒性，從而為臨床眼內用藥提供實驗依據。
　　 方法：
　　 1、篩選健康無眼疾的成年新西蘭大白兔24只，常規(guī)飼養(yǎng)一周。
　　 2、術前常規(guī)測量并記錄每只兔子的眼電生理：行全視野視網膜電流圖（FERG）檢查，記錄暗示混合反應(Max-R)的b波振幅變化。
　　 3、將24只實驗兔隨機分為A、B、C、D四組，每組6只。硫酸異帕米星以生理鹽水分別

5、稀釋成0.1ml含0.5，1.0，2.0，4.0mg異帕米星藥液備用。隨機選取每只兔的一眼為實驗眼，在玻璃體內分別注射0.1ml不同濃度的藥物；對側眼為對照眼，在玻璃體內分別注射0.1ml生理鹽水。
　　 4、術后1天，3天，7天，14天觀察每只實驗兔的眼前節(jié)及眼底情況并記錄結果。每組隨機抽取兩只實驗兔復查FERG。比較各組在各時間點的電生理值有無差異及術前術后的各時間點數值變化，然后對結果進行統(tǒng)計學分析。
　　 5、各

6、組術后第3、7、14天均隨機取兩只兔（此時已做完電生理檢查），摘取眼球，每只兔的兩只眼一只放入10％福爾馬林液中固定，48h后常規(guī)脫水，石臘包埋，制成石蠟切片，做HE染色，觀察視網膜的大體形態(tài)。每只兔的另一只眼立即置入4℃、2.5％戊二醛液中固定，制成投射電鏡圖片，觀察細胞超微結構改變。
　　 結果：
　　 1、裂隙燈檢查：0.5mg，1.0mg，2.0mg，4.0mg四組除了0.5mg組有兩只眼由于注藥技術原因，在玻璃

7、體腔注藥時損傷了晶體，注藥后第一天出現了晶體渾濁。其余各組均無角膜水腫、渾濁、后彈力層無皺褶；前房無出血、滲出等炎癥反應；晶狀體無渾濁；玻璃體無渾濁、出血。各組玻璃體注藥后略見渾濁，一天后消失。
　　 2、直接檢眼鏡檢查：0.5mg，1.0mg，2.0mg，4.0mg各組均無玻璃體渾濁、出血，視網膜均無水腫，出血，脫離，視網膜血管均無閉塞，迂曲，擴張。D組（4mg組）中一只眼于注藥后第一天視網膜局部有水腫，第3天水腫明顯減輕，第

8、14天時水腫消失，其余無異常。
　　 3、視網膜電流圖檢查：Max-R的b波振幅，其中C(2mg)組實驗眼于注藥后3-7天振幅明顯下降，與對照組有顯著性差異，14天時又恢復正常；D(4mg)組實驗眼注藥后3天開始振幅下降，明顯低于對照眼，與對照眼有顯著性差異；其余二組各時間段實驗眼b波振幅與對照眼無顯著性差異。
　　 4、光鏡結果：對照組和各藥物劑量組在各時間段視網膜組織結構均未見異常。
　　 5、電鏡結果：0.

9、5mg，1.0mg組和2.0mg，4.0mg組的對照組各時間段視網膜組織結構均未見異常。2.0mg，4.0mg組實驗眼各時間段異常改變如下：C組(2.0mg)3-7天時可見色素上皮層線粒體輕度腫脹，14天可見色素上皮層線粒體腫脹消失；D組(4.0mg)3天，色素上皮層線粒體輕腫脹，可見巨大溶酶體，7天時色素上皮層線粒體腫脹，脊消失。14天色素上皮細胞內線粒體中度水腫，外節(jié)膜盤紊亂，外從狀層，內核層，節(jié)細胞中度水腫，神經纖維層水腫。