基于樹形聚合物的靶向磁共振造影劑的合成及生物學(xué)評(píng)價(jià).pdf

1、核磁共振造影劑自從20世紀(jì)80年代被發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用以來(lái)，在核磁共振成像中有著獨(dú)特的位置，對(duì)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢測(cè)的發(fā)展起著重要的作用。為了實(shí)現(xiàn)早檢測(cè)、早發(fā)現(xiàn)，本文在樹形大分子基礎(chǔ)上合成了一種新型的靶向性大分子造影劑FA-PEG(4000Da)PAMAM-Gds，初步了研究了其體外細(xì)胞毒性（MTT、FCM實(shí)驗(yàn)），組織急慢性毒性（組織切片），細(xì)胞靶向性(cell-TEM);體內(nèi)MR成像，在MR試驗(yàn)中研究了大分子造影劑的馳預(yù)率，最佳成像濃度，最佳成像時(shí)間以

2、及其在裸鼠體內(nèi)的代謝等。具體內(nèi)容如下：
　　 第一章緒論
　　 核磁共振造影劑是用來(lái)縮短成像時(shí)間、提高成像對(duì)比度和清晰度的一種成像增強(qiáng)對(duì)比劑。它能改變體內(nèi)局部組織中水質(zhì)子的馳預(yù)速率，提高正常與患病部位的成像對(duì)比度，從而顯示體內(nèi)器官的功能狀態(tài)。核磁共振造影劑的繁榮發(fā)展，使得目前存在的MR造影劑多種多樣，其分類方法亦然。四氧化三鐵等超順磁性造影劑、水溶性順磁釓螯合物磁共振造影劑等都得到深入的研究和發(fā)展。新型的靶向大分子造影劑

3、一般指分子量大于20000Da的造影劑復(fù)合物，是一類非常具有研究前景的MR造影劑。我們合成并研究了，樹形大分子(PAMAM)為載體主體的，聚乙二醇(PEG)調(diào)控分子粒徑，葉酸組織靶向型，水溶性順磁性釓螯合物磁共振造影劑：FA-PEG-PAMAM-Gds。
　　 第二章靶向大分子造影劑(FA-PEG-PAMAM-Gds)的合成
　　 采用傳統(tǒng)的發(fā)散法，以乙二胺為核多步邁克爾加成制備了4.0G的樹形大分子聚合物聚酰-胺胺(P

4、AMAM)。將此大分子與丁二酸酐反應(yīng)得到端基為羧基的PAMAM-COOH。葉酸與聚乙二醇反應(yīng)制得一端為氨基的分子量不同的葉酸靶向縮合物：H2N-PEG(1000Da)-NH-FA,H2N-PEG（2000Da)-NH-FA和H2N-PEG(4000Da)-NH-FA。靶向縮合物與端基為羧基的PAMAM-COOH部分縮合反應(yīng)，制備得到靶向大分子載體PAMAM-PEG-FA，同時(shí)制備了兩種不具靶向性的大分子載體mPEG(5000Da)-PA

5、MAM和mPEG(2000Da)-PAMAM。大分子載體與GdC13·6H2O螯合，得靶向型大分子造影劑復(fù)合物FA-PEG-PAMAM-Gds和無(wú)靶向性的造影劑復(fù)合物Gds-PAMAM-PEG。1H-NMR、FT-IR等表征了酰胺鍵縮合等反應(yīng)，證明了合成實(shí)驗(yàn)的成功實(shí)現(xiàn)。SEM、TEM、DLS等手段對(duì)大分子造影劑復(fù)合物進(jìn)行了分子形貌和粒徑表征。
　　 第三章靶向大分子造影劑的體外實(shí)驗(yàn)研究
　　 本章主要研究靶向型造影劑復(fù)合

6、物FP(4000Da)PGds的體外細(xì)胞毒性、生物相容性和細(xì)胞表面的靶向性富集。KB、L929、7702等6種細(xì)胞的MTT實(shí)驗(yàn)，以及輔助性的A549細(xì)胞的FCM實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明了大分子造影劑復(fù)合物FP(4000Da)PGds的基本無(wú)細(xì)胞毒性、生物相容性高。心臟、肺部，等組織器官的切片觀察，表明大分子造影劑復(fù)合物FP(4000Da)PGds的無(wú)急性和慢性組織毒性。細(xì)胞株KB和L929的cell-TEM觀察結(jié)果，表明大分子造影劑復(fù)合物FP(4

7、000Da)PGds在葉酸受體表達(dá)成陽(yáng)性的細(xì)胞表面靶向性富集的良好效果。
　　 第四章靶向大分子造影劑的MRI效果評(píng)價(jià)
　　 FA-PEG(4000Da)-PAMAM-Gds造影劑復(fù)合物的MR實(shí)驗(yàn)均在西門子3.0T Trio Tim磁共振成像儀上完成了。完成動(dòng)物體內(nèi)/皮下腫瘤接種的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)并完成了馳預(yù)率的測(cè)定、體內(nèi)最佳成像時(shí)間確定、代謝規(guī)律初步研究和腫瘤處靶向富集成像等實(shí)，驗(yàn)，對(duì)造影劑復(fù)合物FA-PEG(4000Da