聚合酶鏈反應(yīng)對金黃色葡萄球耐藥性監(jiān)測的研究.pdf

1、目的:了解武漢同濟(jì)醫(yī)院臨床各科室分離的金黃色葡萄球菌對甲氧西林抗生素耐藥的狀況.方法:收集同濟(jì)醫(yī)院臨床各科室1999年分離的金葡菌84株,運(yùn)用聚合酶反應(yīng)(PCR)檢測編碼耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus MRSA)青霉素結(jié)合蛋白(PBP<,2a>)的mecA基因,通過設(shè)計的引物,采用PCR擴(kuò)增耐甲氧西林金葡萄的mecA基因,用地高辛標(biāo)記的特異性探針與PCR擴(kuò)增產(chǎn)物

2、雜交.另外,運(yùn)用紙片擴(kuò)散法對收集的金葡菌進(jìn)行鑒定.結(jié)果:84株金葡菌中獲得8株擴(kuò)增產(chǎn)物為陽性的菌株,用這些陽性產(chǎn)物與地高辛標(biāo)記的探針進(jìn)行Southern blot分析,雜交結(jié)果與PCR結(jié)果一致,同濟(jì)醫(yī)院1999年金葡菌對甲氧西林耐藥率為8.8﹪.使用紙片擴(kuò)散法6株耐甲氧西林金葡菌,耐藥率為7.17﹪.結(jié)論:聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)用于檢測MRSA,其敏感性、特異性較高,且重復(fù)性好,準(zhǔn)確率比實(shí)驗(yàn)室常用紙片法更高,能準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)隱匿型MRSA,為指導(dǎo)