腸胃返流和蛋白酶激活受體-2在殘胃癌發(fā)生過(guò)程中的作用.pdf

1、第一部分殘胃癌的臨床病理特征及預(yù)后
　　殘胃癌是臨床少見(jiàn)疾病，但近年來(lái)殘胃癌發(fā)病率沒(méi)有降低。殘胃癌的預(yù)防和治療是臨床面臨的難題，分析殘胃癌的疾病特點(diǎn)和規(guī)律對(duì)殘胃癌的防治有重要意義。本課題的目的是分析可根治切除殘胃癌臨床病理特征及預(yù)后情況;分析近端胃切除術(shù)后殘胃癌臨床病理特征。
　　回顧分析1999年11月至2013年12月進(jìn)行殘胃癌根治切除術(shù)的63例患者的臨床病理資料，按照初次手術(shù)方式分組和初次手術(shù)時(shí)疾病良惡性分組，分析比較

2、殘胃癌臨床病理特征以及長(zhǎng)期生存率;回顧1999年至2012年近端胃切除術(shù)后殘胃癌患者16例組的臨床病理資料，與對(duì)照組遠(yuǎn)端胃切除術(shù)后殘胃癌患者29例比較分析。
　　按照初次手術(shù)疾病良、惡性分組，殘胃癌發(fā)病的間隔時(shí)間分別為24.8年、8.9年;腫瘤直徑分別為6.9cm、4.3cm;殘胃癌位于吻合口的比例分別為50％、26.3％。按照初次手術(shù)重建方式(BillrothⅡ、BillrothⅠ)分組，殘胃癌發(fā)病的間隔時(shí)間分別為22.8年、1

3、2.3年。腫瘤直徑分別為6.73cm、3.75cm。殘胃癌位于吻合口的比例分別為52.4％、21％。以上各組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。TNMⅠ-Ⅱ期與Ⅲ期患者80個(gè)月生存率分別為64.7％:18.5％(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。初次手術(shù)良性組與初次手術(shù)惡性組，100個(gè)月累計(jì)生存率分別為37.1％、40％，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。BillrothⅡ組與BillrothⅠ組，患者80個(gè)月累計(jì)生存率分別為43

4、.1％、27.3％，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。近端胃切除組與遠(yuǎn)端胃切除組相比，殘胃癌的發(fā)病年齡、發(fā)病間隔時(shí)間、組織學(xué)類型、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、手術(shù)方式、住院天數(shù)等差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。近端胃切除組患者殘胃癌診斷時(shí)TNMⅣ期的比例達(dá)50％，顯著高于遠(yuǎn)端胃切除組的13.8％(P＜0.05)。
　　初次胃切除術(shù)時(shí)疾病良惡性、重建方式與殘胃癌發(fā)病間隔時(shí)間、腫瘤大小、腫瘤好發(fā)部位等臨床特點(diǎn)有關(guān)。潰瘍病術(shù)后殘胃癌的發(fā)病間隔時(shí)

5、間長(zhǎng)，平均24.8年，而胃癌術(shù)后殘胃癌的發(fā)病間隔時(shí)間為8.9年。BillrothⅡ重建術(shù)后發(fā)生的殘胃癌50％以上發(fā)生在吻合口部位?？筛吻谐臍埼赴┗颊撸溟L(zhǎng)期生存率與初次胃切除術(shù)時(shí)疾病良惡性、重建方式無(wú)關(guān)，與TNM分期有關(guān)。近端胃切除術(shù)后殘胃癌與遠(yuǎn)端胃切除術(shù)后殘胃癌一般臨床特征相似。與遠(yuǎn)端胃切除術(shù)后殘胃癌相比，近端胃切除術(shù)后殘胃癌患者診斷時(shí)Ⅳ期比例高，手術(shù)切除率低。
　　第二部分腸胃返流與蛋白酶激活受體-2在小鼠胃粘膜癌變過(guò)程中

6、的作用
　　殘胃癌是臨床少見(jiàn)病，占全部胃癌的1.1％-3.3％，但近年來(lái)殘胃癌發(fā)病率沒(méi)有降低。殘胃癌的發(fā)生與多種因素有關(guān)，例如腸胃返流、胃酸缺乏、細(xì)菌繁殖、遺傳因素等，其中腸胃返流等因素引起的慢性炎癥越來(lái)越受到重視。由于腸胃返流的長(zhǎng)期作用，胃粘膜由慢性炎癥、異常增生演變成癌癥，但是其中炎癌轉(zhuǎn)化的分子機(jī)制仍不十分清楚。蛋白酶激活受體-2（PAR-2）屬于G蛋白偶聯(lián)受體，在消化道廣泛表達(dá)，參與調(diào)節(jié)炎癥和腫瘤等病理過(guò)程。返流液中富含胰蛋

7、白酶，它可以激活胃粘膜表達(dá)的（PAR-2）并啟動(dòng)多種信號(hào)通路，但是PAR2是否參與炎癥相關(guān)腫瘤的發(fā)生還是未知。本課題的目的:建立小鼠腸胃返流模型并初步探討PAR-2在殘胃癌發(fā)生中的作用。
　　為模擬BillrothⅡ重建后的返流，采用胃空腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)建立小鼠腸胃返流模型，術(shù)后空腸上段的腸液、膽汁、胰液可返流入胃。除了胃空腸吻合術(shù)組外（小鼠共12只），我們還設(shè)立了兩個(gè)對(duì)照組:假手術(shù)組（9只）僅做胃切開(kāi)縫合術(shù);空白對(duì)照組（6只），不作

8、任何處理。在胃腸吻合術(shù)后1、3、6個(gè)月分別處死各組小鼠取出胃標(biāo)本。通過(guò)HE染色判斷小鼠胃各階段的組織病理學(xué)改變。用Westren Blot、免疫組化和實(shí)時(shí)熒光定量PCR等方法檢測(cè)小鼠胃組織炎癥介質(zhì)、PAR-2的表達(dá)情況。此外，我們還收集了39例人殘胃癌標(biāo)本，通過(guò)免疫組化檢測(cè)人殘胃癌組織PAR-2表達(dá)。
　　成功建立了小鼠腸胃返流模型，術(shù)后胃腸吻合口明顯擴(kuò)張、胃液膽汁酸水平增高，提示存在腸胃返流。病理結(jié)果顯示:胃腸吻合術(shù)組小鼠術(shù)后胃

9、粘膜出現(xiàn)慢性炎癥，根據(jù)炎癥程度分級(jí)評(píng)分，術(shù)后3個(gè)月、6個(gè)月炎癥最重，評(píng)分最高，與假手術(shù)組、空白對(duì)照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。胃腸吻合術(shù)組術(shù)后3個(gè)月和6個(gè)月，可見(jiàn)多例腸上皮化生和不典型增生;而假手術(shù)組和空白對(duì)照組未發(fā)現(xiàn)明顯的腸上皮化生和不典型增生。胃腸吻合術(shù)后，小鼠胃組織中IL-6、IL-8、TNF-α、COX-2、iNOS、PAR-2的mRNA水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而且與對(duì)照組相比，胃腸吻合術(shù)組

10、小鼠胃組織的PAR-2蛋白水平也顯著升高。人殘胃癌PAR-2染色與初次手術(shù)方式有關(guān)，BillrothⅡ重建后殘胃癌PAR-2陽(yáng)性率高于BillrothⅠ重建及Roux-en-Y重建后殘胃癌。腸型殘胃癌PAR-2陽(yáng)性率高于彌漫性殘胃癌。
　　本課題得出如下結(jié)論:1、小鼠胃空腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)可以成功模擬臨床胃切除術(shù)后殘胃返流的病理過(guò)程;2、長(zhǎng)期腸胃返流能導(dǎo)致小鼠胃粘膜慢性炎癥，并伴有癌前病變（腸上皮化生、不典型增生）;3、腸胃返流顯著促進(jìn)