胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在仿刺參再生過程中的表達(dá)分析.pdf

1、胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶在動物的許多生理過程中起著十分重要的作用，包括創(chuàng)傷修復(fù)，炎癥反應(yīng)，凝血反應(yīng)，再生等功能。
　　 本文通過基因克隆(RACE)技術(shù)首次獲得了仿刺參胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶的全長cDNA序列，該序列含有1216bp堿基對，5’端有39bp的非編碼區(qū)，3’端有355bp的非編碼區(qū)。通過基因步移的實驗手段得到了胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因包括內(nèi)含子和外顯子在內(nèi)的DNA序列，該序列包括含有4個內(nèi)含子序列和5個外顯子序列。

2、用原位雜交技術(shù)來檢測胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶在不同組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶在體壁，腸，呼吸樹等組織中均有分布，其中在腸中的信號最強。用Realtime-PCR技術(shù)分別檢測胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在不同組織的不同再生階段的表達(dá)模式。結(jié)果顯示在再生一小時內(nèi)的體壁中，胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因呈現(xiàn)出短暫并明顯的上調(diào)趨勢，接著表達(dá)量下調(diào)，隨著組織的再生，胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因表達(dá)量上調(diào)，最后達(dá)到正常水平。在腸和呼吸樹中，

3、胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因的表達(dá)量隨著組織的再生呈現(xiàn)出上升趨勢。但是在這些組織中胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因的表達(dá)量一直低于正常水平直到再生出新組織表達(dá)量恢復(fù)到正常水平。胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在仿刺參不同再生階段的表達(dá)量的變化表明其在再生過程中起著重要的作用。
　　 對仿刺參胰蛋白酶樣絲氨酸蛋白酶基因在其不同再生過程中表達(dá)模式的研究對于闡明仿刺參再生調(diào)控通路和相關(guān)分子機制的有著重要意義。同時，對于進(jìn)一步了解仿刺參苗種生產(chǎn)和養(yǎng)殖