胰腺癌細(xì)胞球的培養(yǎng)及其生物學(xué)特性的研究.pdf

1、目的：腫瘤干細(xì)胞理論的提出為認(rèn)識(shí)腫瘤提供了新的思路，越來(lái)越多的腫瘤干細(xì)胞已經(jīng)得到分離和鑒定；本文旨在應(yīng)用無(wú)血清培養(yǎng)基分離胰腺癌細(xì)胞球，并檢測(cè)其miR-590-3p的表達(dá)。
　　 方法：運(yùn)用無(wú)血清培養(yǎng)基克隆培養(yǎng)ASPC-1，PANC-1細(xì)胞，檢測(cè)其自我更新及分化、細(xì)胞周期、侵襲實(shí)驗(yàn)、成瘤能力和表面標(biāo)記物CD24/CD44表達(dá)等，驗(yàn)證其腫瘤干細(xì)胞特性。熒光定量PCR技術(shù)(qRT-PCR)檢測(cè)miR-590-3p在胰腺癌細(xì)胞球中的表達(dá)

2、。
　　 結(jié)果：少量ASPC-1和PANC-1細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基中能存活，呈克隆球樣懸浮生長(zhǎng)，并可以在體外連續(xù)傳代，加入血清后細(xì)胞球帖壁分化。ASPC-1，PANC-1細(xì)胞球G0/G1期分別為(75.3±5.4)％，(80.1±4.7)％；ASPC-1和PANC-1細(xì)胞球的平均穿膜細(xì)胞數(shù)分別為147.3±18.6，113.2±12.9個(gè)，較細(xì)胞系具有較強(qiáng)的侵襲能力；ASPC-1和PANC-1細(xì)胞球移植形成腫瘤所需最少細(xì)胞數(shù)為5×

3、10 5個(gè)，其成瘤能力是普通細(xì)胞系的100倍；ASPC-1，PANC-1細(xì)胞球CD24+CD44+比例分別為0.38％-0.43％，4.91％-5.21％，高于細(xì)胞系中的表達(dá)（P<0.05）；ASPC-1，PANC-1細(xì)胞球miR-590-3p表達(dá)分別是細(xì)胞系的4.67，4.52倍（P＜0.05）。
　　 結(jié)論：應(yīng)用無(wú)血清培養(yǎng)基可以從ASPC-1，PANC-1細(xì)胞系中分離出具有干細(xì)胞特性的胰腺癌細(xì)胞球，其miR-590-3p表達(dá)