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1、目的:利用右心室快速起搏的方法建立類似于擴(kuò)張性心肌病慢性充血性心衰模型,在DSA下經(jīng)冠狀動(dòng)脈注射自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞,研究自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植后對(duì)慢性充血性心力衰竭心臟功能的影響,并初步探討其機(jī)理。 方法:lO只太湖梅山豬經(jīng)右心室快速起搏230次/分4周后隨機(jī)分為2組:A組為對(duì)照組,B組為實(shí)驗(yàn)組。抽取實(shí)驗(yàn)豬髂骨骨髓體外經(jīng)過密度梯度離心法分離得到骨髓單個(gè)核細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)組起搏4周后在DSA下經(jīng)冠狀動(dòng)脈行骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植,對(duì)照組注射D
2、MEM培養(yǎng)基。在起搏前、起搏4周后、移植4周后不同時(shí)間點(diǎn)以心超多普勒檢測(cè)心臟形態(tài)學(xué)變化;以Powerlab8SP+Millar壓力導(dǎo)管檢測(cè)心室內(nèi)壓力并制成壓力變化曲線分析心室收縮功能變化;在細(xì)胞移植前后不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)血清VEGF和bFGF值;實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)時(shí)獲取豬心,通過免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)移植細(xì)咆在心肌內(nèi)存活情況,并檢測(cè)心肌血管密度。 結(jié)果:(1)所有的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在起搏后4周,心超測(cè)定顯示其EF值、CO值和FS值較起搏前
3、明顯降低,LVEDD和LVESD較起搏前增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p<0.05。實(shí)驗(yàn)豬LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax較起搏前明顯降低,LVEDP較起搏前明顯升高,差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p<0.01。(2)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物在骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植后約一周時(shí)心衰癥狀有所好轉(zhuǎn),進(jìn)食增加,活動(dòng)能力加強(qiáng),移植后4周時(shí)動(dòng)物的活動(dòng)能力明顯好轉(zhuǎn)。(3)移植后4周時(shí)的心超測(cè)定顯示實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物的EF值、CO值和FS值較術(shù)前增加,LVEDD值和LVESD
4、值較術(shù)前減低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p 5、整合至毛細(xì)血管壁中,實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比血管密度有明顯上升。 結(jié)論:(1)通過右心室超速起搏的方法建立的類似擴(kuò)張型心肌病模型在心臟形態(tài)學(xué)變化及心室收縮功能變化上符合慢性充血性心力衰竭特征,可作為研究該類心血管疾病的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)。(2)自體骨髓單個(gè)核細(xì)胞移植治療慢性充血性心衰是有效、安全的。(3)骨髓單個(gè)核細(xì)胞改善心衰心功能的可能機(jī)制:移植后移植細(xì)胞可分化成為心肌樣細(xì)胞增加心肌細(xì)胞數(shù)量,分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞參與血管再生改善心肌血流灌注,同
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