WWOX、Smad4基因啟動(dòng)子甲基化與食管鱗狀細(xì)胞癌關(guān)系研究.pdf

1、目的:食管鱗狀細(xì)胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是我國(guó)常見的消化道惡性腫瘤之一。近年來,許多學(xué)者對(duì)食管癌已經(jīng)進(jìn)行了大量開創(chuàng)性的研究。雖然對(duì)于食管癌已進(jìn)行了很多干預(yù)措施,但是食管癌發(fā)病隱蔽,出現(xiàn)癥狀時(shí)已是中晚期。為降低食管癌的發(fā)病率和死亡率就要對(duì)其發(fā)病機(jī)制進(jìn)行更進(jìn)一步的研究。
　　 近年來以DNA甲基化為代表的表觀遺傳學(xué)改變已經(jīng)成為研究腫瘤發(fā)病機(jī)制的一個(gè)熱點(diǎn)而被廣泛關(guān)注。本項(xiàng)研

2、究通過研究WWOX、Smad4基因在食管癌及癌旁組織中的甲基化情況,探討基因甲基化的發(fā)生和食管癌的發(fā)生,轉(zhuǎn)移和分化程度之間的關(guān)系,從而為食管癌的發(fā)病機(jī)制,基因治療及臨床預(yù)后等方面提供新的理論和試驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:
　　 1應(yīng)用甲基化特異性PCR(methylation specific PCR,MSP)技術(shù)檢測(cè)69例食管癌組織,48例癌旁組織中WWOX、Smad4基因的甲基化情況。
　　 2應(yīng)用RT-PCR法

3、檢測(cè)44例癌組織和15例癌旁組織中WWOX、Smad4基因的mRNA表達(dá)情況。
　　 3運(yùn)用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1 WWOX基因甲基化發(fā)生率及其與臨床病理學(xué)資料的關(guān)系
　　 WWOX基因在食管癌和癌旁組織中的甲基化發(fā)生率分別為26.1％(18/69)、4.2％(2/48),食管癌組織中WWOX基因甲基化發(fā)生率顯著高于癌旁組(P<0.05)；按TNM分期進(jìn)行統(tǒng)

4、計(jì)分析,Ⅲ/Ⅳ期食管癌患者中WWOX基因甲基化發(fā)生率(43.3％)高于Ⅰ/Ⅱ期患者(12.8％),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.004)。WWOX基因在小于60歲組的甲基化發(fā)生率28.1％高于大于等于60歲組的甲基化發(fā)生率24.3％(9/37),女性WWOX基因甲基化發(fā)生率31.3％大于男性甲基化發(fā)生率24.5％,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組甲基化發(fā)生率35.5％大于無轉(zhuǎn)移組的甲基化發(fā)生率18.4％,但均無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　

5、2 Smad4基因甲基化發(fā)生率及其與臨床病理學(xué)資料的關(guān)系
　　 Smad4基因在69例食管癌患者的癌組織及48例癌旁組織中的甲基化率分別為2.9％(2/69)、8.3％(4/48),食管癌組織的甲基化發(fā)生率略低于癌旁組,但差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 3 WWOX、Smad4基因mRNA的表達(dá)情況
　　 WWOX mRNA在食管鱗癌組織、癌旁組織中的相對(duì)表達(dá)量分別為0.77±0.16,和0.89±0

6、.12,癌組織中的表達(dá)量明顯低于癌旁組織(P<0.05)；Smad4mRNA在癌組織、癌旁組織中的相對(duì)表達(dá)量分別為0.75±0.17和0.88±0.14,癌組織中的表達(dá)量明顯低于癌旁組織(P<0.05)。WWOX、Smad4的mRNA表達(dá)與組織分化程度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期、年齡、性別之間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 4癌組織中WWOX基因甲基化與mRNA表達(dá)之間的關(guān)系
　　 甲基化陽性食管鱗癌組織W

7、WOX mRNA相對(duì)表達(dá)量(0.73±0.15),比甲基化陰性食管鱗癌組織mRNA相對(duì)表達(dá)量(0.76±0.17)低,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.13)。
　　 結(jié)論:
　　 1 WWOX基因在食管癌組織的甲基化發(fā)生率顯著高于癌旁組織,提示W(wǎng)WOX基因甲基化可能參與食管癌的發(fā)生；Smad4基因在癌組織及癌旁組織中的甲基化發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示Smad4基因甲基化可能與食管癌的發(fā)生無關(guān)。
　　 2按TNM分期