藍銅蛋白分子內電子傳遞機理研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、藍銅蛋白(Rusticyanin)是第Ⅰ類銅蛋白家族成員，是氧化亞鐵硫桿菌中鐵呼吸電子鏈中重要的組分。該蛋白分子內的銅原子與Cys138，His85、His143以強健結合，與Met148以較弱的鍵結合，形成四面體結構。Cys138和His85只是維持銅與蛋白結合的關鍵位點，Met148位點軸向配體對于氧化還原電子傳遞有一定的影響，但并不是控制氧化還原反應的關鍵位點，His143位點目前對其的研究還很少，很可能是氧化還原的開關，但目前沒

2、有相關文獻報道過。
　　本論文從嗜酸亞鐵氧化硫桿菌中克隆出藍銅蛋白基因，構建了藍銅蛋白重組質粒，并將其在大腸桿菌載體中表達，用親和一步層析方法純化。光譜學數據表明其能夠和IRO蛋白發(fā)生反應，證明了目前亞鐵氧化系統(tǒng)電子傳遞的途徑：IRO和藍銅蛋白之間發(fā)生了電子傳遞。
　　本論文構建了His143位點的定點突變質粒，并將其在大腸桿菌中表達用鎳柱純化。通過聚丙烯酰胺凝膠電泳，光譜學數據確定143位點是藍銅蛋白與外界電子傳遞的關鍵位

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