14077.三株喜溫嗜酸硫桿菌菌種保藏及其遺傳多樣性比較研究

1、中圖分類號(hào)Q窆3窆：窆2UDC579碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼密級(jí)10533三株喜溫嗜酸硫桿菌菌種保藏及其遺傳多樣性比較研究PreservationandgeneticdiversityofthreeAcidithiobacilluscaldusstrains作者姓學(xué)科專研究方學(xué)院(系、指導(dǎo)教名：段紅業(yè)：微生物學(xué)向：微生物冶金所)：資源加工與生物工程學(xué)院師：吳學(xué)玲副教授論文答辯日期堡!堡墅蘭蘭答辯委員會(huì)主中南大學(xué)二。一三年五月碩士學(xué)位論文摘要

2、三株喜溫嗜酸硫桿菌菌種保藏及其遺傳多樣性比較研究摘要：近年來(lái)，生物浸出在浸礦方面取得了重大的進(jìn)展，并顯示出很好的應(yīng)用前景，尤其是對(duì)低品位礦的處理。喜溫嗜酸硫桿菌是在40℃～50。C硫化礦浸出中起主要作用的硫氧化細(xì)菌，它可以有效促進(jìn)硫化礦的浸出效率。然而，研究結(jié)果和工業(yè)應(yīng)用表明，菌株在頻繁傳代的過(guò)程中會(huì)發(fā)生突變，浸出能力降低，出現(xiàn)退化現(xiàn)象。因此，菌種資源的保藏工作必不可少。此外，來(lái)源不同的浸礦菌雖然同屬一個(gè)種，但是種間有些菌株在理化特性上

3、有較大的差異且對(duì)金屬硫化礦物的浸出效果是不一樣的，同時(shí)在遺傳組成方面差異顯著，即遺傳多樣性。本文選用了保護(hù)劑聚乙二醇2000、聚乙二醇12000、聚乙二醇20000和甘油對(duì)三株喜溫嗜酸硫桿菌進(jìn)行液氮冷凍保藏，并對(duì)其最佳的保藏條件進(jìn)行了探索。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明以30％的PEG2000的保護(hù)效果最佳。因此選用30％的PEG2000和30％的甘油作為長(zhǎng)期液氮保藏三株喜溫嗜酸硫桿菌的保護(hù)劑，分別觀察保藏半年后、一年后觀察菌株的存活、生長(zhǎng)以及硫氧化

4、情況。結(jié)果表明盡管保藏一年后菌株的存活、生長(zhǎng)以及硫氧化情況均有所降低，但是30％的PEG2000保藏的效果明顯優(yōu)于30％的甘油，選用30％的PEG2000作為液氮保藏保護(hù)劑，喜溫嗜酸硫桿菌至少可以存活一年以上。本文采用16SrDNA序列和16S23S間隔序列、Rep—PCR、APPCR和RAPD技術(shù)對(duì)分離自中國(guó)不同地區(qū)的三株喜溫嗜酸硫桿菌進(jìn)行了遺傳多樣性分析。三株喜溫嗜酸硫桿菌的16SrDNA序列和16S23S間隔序列的相似性分別為99