10399.腫瘤細(xì)胞的表面增強(qiáng)拉曼光譜高靈敏檢測新方法及其近紅外光熱治療研究

1、學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實(shí)的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究所做的貢獻(xiàn)均己在論文中作了聲明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名：互》轆秦日期：wf臼硎“9學(xué)位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存本學(xué)位論文的

2、電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部內(nèi)容，可以采用影印、復(fù)印等手段保存、匯編本學(xué)位論文。學(xué)?？梢韵驀矣嘘P(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。(保密論文在解密后遵守此規(guī)定)保密論文注釋：本學(xué)位論文屬于保密論文，密級：壘生保密期限為——年。學(xué)位論文作者簽名：互P糟蒜日期：加16繃蜘指導(dǎo)教師簽名：鉉日期：hf6車期彳目摘要從而產(chǎn)生顯著增強(qiáng)的4ATP拉曼信號，口J‘干艮據(jù)該信號進(jìn)行A549細(xì)胞的高靈敏

3、檢測。研究表明，該方法不僅能夠?qū)崿F(xiàn)對A549細(xì)胞的高靈敏檢測，其檢測限可達(dá)到10cells／mL，而且檢測過程不需要反復(fù)的洗滌程序。在磁場的作用下，SERS探針antiCEA／4ATP／Fe304一AuNPs、SERS活性基底antiCEA／AuNPs和A549細(xì)胞能夠快速地富集。同時(shí)，由于該檢測信號的增強(qiáng)是基于抗原抗體的特異性結(jié)合產(chǎn)生的熱點(diǎn)效應(yīng)，因此該檢測還具有高的特異性。此外，該方法還可用來檢測不同型別的腫瘤細(xì)胞表面CEA的表達(dá)水平

4、。研究結(jié)果表明A549細(xì)胞表面的CEA表達(dá)水平最高，MCF一7和SKBR3細(xì)胞表面CEA的表達(dá)水平分別為A549的81％和77％，而HeLa和Colo一320DM細(xì)胞表面CEA則為負(fù)表達(dá)。該檢測結(jié)果與文獻(xiàn)中報(bào)道的結(jié)果一致，驗(yàn)證了該方法的可靠性。2在本章中我們制備了AptamerAuPPyNPs，并將其用于人乳腺癌細(xì)胞MCF7的SERS檢測和近紅外光療。首先，以聚乙烯醇(PVA)為穩(wěn)定劑，用Fe”作氧化劑，通過聚合作用，制得聚吡咯納米粒子

5、(PPyNPs)(其粒徑約為80nm)，表面帶有大量的正電荷(f電位為343mY)：接著通過靜電吸附作用，將帶有負(fù)電荷的AuNPs(f電位為一354mV)包裹在PPyNPs的表面，制得PPy—Au復(fù)合納米粒子，并用TEM電鏡和SEM電鏡等進(jìn)行了表征；然后通過Au—S鍵的作用將適配體S22固定在PPy—AuNPs的表面。DIC、熒光、Raman光譜和TEM結(jié)果表明，制備的納米復(fù)合物可以通過S22和MCF一7細(xì)胞表面的粘蛋白MUCI之間的特

6、異性識別作用結(jié)合在MCF一7細(xì)胞表面，從而特異性識別MCF7細(xì)胞。制備的AptamerAuPPy納米復(fù)合物還具有強(qiáng)的SERS效應(yīng)，能夠利用其自身的Raman信號靈敏地檢測乳腺癌細(xì)胞MCF7。進(jìn)一步將制備的AptamerAu—PPy納米復(fù)合物應(yīng)用于MCF7細(xì)胞的光熱治療。研究結(jié)果表明，AptamerAuPPy納米復(fù)合物能吸收近紅外光并將光能轉(zhuǎn)化為熱能傳遞給靶細(xì)胞MCF7，在功率密度為1W／cm2的近紅外光下照射20rain，能有效殺死MC