10399.腫瘤細胞的表面增強拉曼光譜高靈敏檢測新方法及其近紅外光熱治療研究

1、學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實驗、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對本研究所做的貢獻均己在論文中作了聲明并表示了謝意。學位論文作者簽名：互》轆秦日期：wf臼硎“9學位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬南京師范大學。學校有權(quán)保存本學位論文的

2、電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學位論文的部分或全部內(nèi)容，可以采用影印、復印等手段保存、匯編本學位論文。學?？梢韵驀矣嘘P(guān)機關(guān)或機構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。(保密論文在解密后遵守此規(guī)定)保密論文注釋：本學位論文屬于保密論文，密級：壘生保密期限為——年。學位論文作者簽名：互P糟蒜日期：加16繃蜘指導教師簽名：鉉日期：hf6車期彳目摘要從而產(chǎn)生顯著增強的4ATP拉曼信號，口J‘干艮據(jù)該信號進行A549細胞的高靈敏

3、檢測。研究表明，該方法不僅能夠?qū)崿F(xiàn)對A549細胞的高靈敏檢測，其檢測限可達到10cells／mL，而且檢測過程不需要反復的洗滌程序。在磁場的作用下，SERS探針antiCEA／4ATP／Fe304一AuNPs、SERS活性基底antiCEA／AuNPs和A549細胞能夠快速地富集。同時，由于該檢測信號的增強是基于抗原抗體的特異性結(jié)合產(chǎn)生的熱點效應，因此該檢測還具有高的特異性。此外，該方法還可用來檢測不同型別的腫瘤細胞表面CEA的表達水平

4、。研究結(jié)果表明A549細胞表面的CEA表達水平最高，MCF一7和SKBR3細胞表面CEA的表達水平分別為A549的81％和77％，而HeLa和Colo一320DM細胞表面CEA則為負表達。該檢測結(jié)果與文獻中報道的結(jié)果一致，驗證了該方法的可靠性。2在本章中我們制備了AptamerAuPPyNPs，并將其用于人乳腺癌細胞MCF7的SERS檢測和近紅外光療。首先，以聚乙烯醇(PVA)為穩(wěn)定劑，用Fe”作氧化劑，通過聚合作用，制得聚吡咯納米粒子

5、(PPyNPs)(其粒徑約為80nm)，表面帶有大量的正電荷(f電位為343mY)：接著通過靜電吸附作用，將帶有負電荷的AuNPs(f電位為一354mV)包裹在PPyNPs的表面，制得PPy—Au復合納米粒子，并用TEM電鏡和SEM電鏡等進行了表征；然后通過Au—S鍵的作用將適配體S22固定在PPy—AuNPs的表面。DIC、熒光、Raman光譜和TEM結(jié)果表明，制備的納米復合物可以通過S22和MCF一7細胞表面的粘蛋白MUCI之間的特

6、異性識別作用結(jié)合在MCF一7細胞表面，從而特異性識別MCF7細胞。制備的AptamerAuPPy納米復合物還具有強的SERS效應，能夠利用其自身的Raman信號靈敏地檢測乳腺癌細胞MCF7。進一步將制備的AptamerAu—PPy納米復合物應用于MCF7細胞的光熱治療。研究結(jié)果表明，AptamerAuPPy納米復合物能吸收近紅外光并將光能轉(zhuǎn)化為熱能傳遞給靶細胞MCF7，在功率密度為1W／cm2的近紅外光下照射20rain，能有效殺死MC