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1、華中科技大學碩士學位論文人干擾素α2b(HuIFNα2b)基因的煙草細胞核轉化及其葉綠體定點表達載體的構建姓名:趙穩(wěn)申請學位級別:碩士專業(yè):生物化學與分子生物學指導教師:何光源20100523華中科技大學碩士學位論文華中科技大學碩士學位論文AbstractInterferonshavemanyclinicalapplicationsduetotheirabilitiesofinhibitingviralreplication,cellg
2、rowthenhancingtheimmuneresponse.Humaninterferonα2b(HuIFNα2b)ranksthirdinwldmarketusefbiopharmaceutical.HoweverHuIFNα2bisunavailabletomostpatientsindevelopingcountriesbecauseofitshighcost.Inrecentyearsplantbasedexpression
3、systemhasbecomethehottopicofresearchfproducingbiopharmaceuticalproteinsfpreventiontherapyinthelargescale.Comparingtosometraditionalexpressionsystemssuchasmicrobialsystemanimalcellstransgenicplantshavemanyadvantages.Themo
4、stattractiveadvantageisthecomparativelylowcost.Besidestransgenicplantswhichbelongtoeukaryoticganismscanproducebiopharmaceuticalproteinswithfullybiologicalactivity.Meoverhumancanavoidthecomtaminationfrompathogeniconcogeni
5、cDNAsequencesendotoxinsofplants.InthepresentresearchweconstructedHuIFNα2bexpressionvectsbothfnucleuschloplastsintergrationintobacco,successfullytransfmedthevectfnucleusintotobacconucleusgenomeviaAgrobacteriummediatedmeth
6、od.Themainresultsareasfollows..1)Theprokaryoticexpressionvectpet28aIFNfHuIFNα2bwasconstructedtransfmedintoE.coli.TheexpressionofHuIFNα2bwascomfirmedbySDSPAGE.2)ThenuclearexpressionvectpBIFNfHuIFNα2bwasconstructedtransfme
7、dintotobaccoleafdiscsviaAgrobacteriummediatedmethod.Thirtyfivepositiveregeneratedtransfmantswereobtained.3)ThesitespecifictransfmationexpressionvectpCL151IFNfHuIFNα2bintobaccochloplastswasconstructed.HuIFNα2bgene,whichco
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