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1、南昌大學(xué)博士學(xué)位論文魚類PKZ(ProteinKinaseContainingZDNABindingDomain)Zα與ZDNA的結(jié)合姓名:吳初新申請學(xué)位級別:博士專業(yè):動物學(xué)指導(dǎo)教師:胡成鈺20100608摘要pMD18T/d(GC)n等各種重組質(zhì)粒的親和性。結(jié)果顯示,野生型Pzalz以和替換型PzaIZal對重組質(zhì)粒pMDl8一T/d(GC)n具有很高的親和性,并且后者的結(jié)合能力強于前者。若解除pMDl8T/d(GC)n的負(fù)超螺旋,
2、它們間的阻滯效應(yīng)便會消失,這表V韭JpMDl8T/d(GC)。的Z形構(gòu)象是為其負(fù)超螺旋所維持的。同時,競爭性實驗表明PZal恥對于重組質(zhì)粒pMDl8T/d(GC)。的結(jié)合具有特異性。另一方面,替換型P緞a2以及9個點突變型蛋白卻喪失了對pMDl8一T/d(GCh親和能力。與此同時,通過瓊脂糖凝膠阻滯實驗還檢測了Pzalza2與重組質(zhì)粒pMD一18T/d(TA)n、pMO一18T/d(non—GC—repeat)n的親和性。結(jié)果表明,Pz
3、ⅡIza2與pMD18T/d(nonGCrepeat)n、pMD18T/d(TA)n的結(jié)合都很弱,尤以pMD18T/d(TA)n表現(xiàn)為最弱。另外,我們還克隆了草魚CiPKZ全長cDNA序列及其啟動子序列。序列分析表明,草魚CiPKZ基因序列與鯽魚CaPKZ的具有極高的同源性。RTPCR分析結(jié)果顯示,草魚CiPKZ具有廣譜的組織表達(dá)特性,PolyI:C誘導(dǎo)后其表達(dá)均會上調(diào)。這些結(jié)果表明,魚類PKZ能夠為病毒所誘導(dǎo)、并可能參與宿主細(xì)胞的免疫
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