魚類組織細胞培養(yǎng)及魚類胚胎細胞的冷凍保存與培養(yǎng)技術的初步研究.pdf

1、湖南師范大學碩士學位論文魚類組織細胞培養(yǎng)及魚類胚胎細胞的冷凍保存與培養(yǎng)技術的初步研究姓名：鄧云申請學位級別：碩士專業(yè)：動物學指導教師：張軒杰20020301正常，4n為187—200之間，末發(fā)現明顯的異倍化現象。另一個方面，本文主要以泥鰍胚胎細胞為材料，根據細胞凍存的有關原理技術，進行泥鰍胚胎細胞制備、冷凍保存、解凍、原代培養(yǎng)研究。研究初步表明：以細胞培養(yǎng)液M199(含20％的小牛血清，常規(guī)量雙抗)為凍存稀釋液，對泥鰍胚胎細胞冷凍保存宜

2、采取先慢后快的方式(例如，從OC6℃，凍存速度為一005℃／min，再以一05℃／min的速度從一6℃一一40℃)；DMSO的保護效應濃度為125％左右；小牛血清的濃度對泥鰍胚胎細胞的成活率影響不明顯；囊胚晚期細胞抗凍性比中早期強；通過對不同批次的凍存細胞解凍培養(yǎng)，解凍后成活率為30％pA上細胞培養(yǎng)數天后，均有少數細胞貼壁，但只發(fā)現兩瓶培養(yǎng)細胞有明顯增殖現象，產生許多未分化的小細胞。以細胞培養(yǎng)液M199(含20％的小牛血清)為稀釋液，D