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1、江南大學(xué)碩士學(xué)位論文微生物轉(zhuǎn)化法產(chǎn)γ氨基丁酸姓名:楊帆申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物化工指導(dǎo)教師:徐巖李江華20080601AbstractAbstract7arninobutyricacid(GABA)iSanonproteinaminoacidthatiSwidelydistributedinnatureGABAinthebrainandspinalcordofmammalswithavarietyofeffectsinthecent
2、ralnervoussystemasinhibitoryneurotransmitterfunction,GABAisagoodmedicaldrugsandrawmaterialsforhealthcareGABAplayedapoultryheatstressandgrowthpromotingeffectInthispapertheEcoli(AS1505)whichhashighactivityofglutamatedecarb
3、oxylaseastheoriginalitystrainThestraintransforillLglutamicacidaSsubstratetoGABAAseriesofschemewereusedinordretoachievehighyield,hi曲concentrationandhighproductivityofGABAproduction即1emainelementsofthisthesisareaSfollows:1
4、CompositionsofculturemediumandcultureconditionswerestudiedtoimprovequantityofGlutamicaciddecarboxylase(GAD)producedbyAS1505liquidcultureTheoptimizedmediumandconditionswereaSfollows:glucose10%,tryptone3O%,NaClO3%,K2HP043H
5、2001%(w/v),MgS047H20002%(w/v),Lglutarnicacid001%(w/v),COrnsteepliquor15%(w/v),biotin30ttg。L一,bran4%(w/v),initialpH70,37℃,liquidvolume25mL/250mLbaffledflaSk,for20hoursTheactivityofGADwas1290unitsofeachmilliliterbrothunder
6、theseconditions2TheconditionsoftransformationfromL—glutamicacidtOGABA,includingtemperature,pH,buffersystem,strainconcentrationsubstrateconcentrationandreusetimesofstrainwereoptimized:temperature37℃,pH46,Na2HP04一citricaci
7、dastheoptimizedbuffersystem,theratioofvolumeoffermentationbrothtotransformationbroth2:1defmed鶴optimizedstrainconcentration,substratcconcentration03molL~,reusewithinthreetimes3Undertheglucoselimitedcondition,thegrowthofGA
8、DproducercouldbesupposedbyMonodequationwithtmax=O543h1andKs=O102gLqinthecontinuouscultureprocess111emaximumyieldofbiomassandGADproductwere%=0434gg~,respectivelyThemaximumdilutionrateWasDm=045h~111emaximumbiomassyieldandt
9、heGADyieldare1785g(Lh)~and11934U。(LhmL)一,respectively4n地effectsofpH,ventilationvolume,stirringspeedandfedbatchoncultureprocessandtransformationwereinvestigatedin5LfermentorWhenpHwascontrolledat70,theventilationvolume,sti
10、rringspeed,totalconcentrationofglucoseinculturemediunlandinitialglucoseconcentrationwere15vvm,600印鷗3083gL~and107gL~,respectively1kresidualglucosesolutionasfedbatchbeganfeedingsteadilyafterculturefor2h111efedbatchWaSended
11、after5handthebiomassreachedthehighestvaluearound181gLqafterculturefor1lhFinally,60gL~GABAWasobtainedfrom882gL~Lglutamicacidaftertransformationfor16ll,conversionlevelreachs100%Keywords:7aminobutyricacid,Ecoil,Optimization
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