29423.早竹ap1squa、rev、tb1like基因的功能研究與竹筍micrornas的克隆和表達分析

1、浙江大學生命科學學院博士學位論文早竹AP1SQUA、REV、TB1like基因的功能研究與竹筍micrNAs的克隆和表達分析姓名：林二培申請學位級別：博士專業(yè)：遺傳學指導教師：朱睦元20090501浙江大學博士學位論文察到顯著差異原位雜交結(jié)果進一步表明這兩個基因雖然都在花分生組織中表達，但在成熟小花的雄蕊中只；有PpMADS2表達，這說gJqPpMADSl和PpMADS2：部參與了花的早期發(fā)育，即參與到了竹子的花期轉(zhuǎn)換，而刪D&還與竹子

2、小花的雄蕊發(fā)育有關(guān)，可能對早竹花的發(fā)育有更重要的作用2竹子月E胙和船J1ike基因的克隆、表達和初步的進化分析大部分栽培的竹種主要通過竹鞭進行繁殖，鞭芽發(fā)育成竹筍或者竹鞭的機理目前還不清楚。已經(jīng)證實REVOLUTA(REV)likeClassIIIhomeodomainleucinezipper(1iD—Zip)蛋白和TEOSlNTEBRANCHED1(TBI)一like轉(zhuǎn)錄因子已經(jīng)證實在植物分生組織的啟動和向外生長中起重要的調(diào)控作用。

3、本研究從早竹中克隆到肛阼(PpHBl)和TBllike(PpTBI)基因，并對它們的表達和系統(tǒng)進化進行了初步分析。原位雜交實驗發(fā)現(xiàn)PpHBl主要在側(cè)芽的頂端，葉的內(nèi)側(cè)以及發(fā)育中前形成層中表達，表明印冊』與鞭芽形成和前形成層的發(fā)育有關(guān)。而PpTBl主要在處于發(fā)育后期的芽的頂部的表達，表明它的功能可能與芽的向外生長有關(guān)這些結(jié)果暗示這兩個基因可能在竹子鞭筍發(fā)育中有重要的功能。此外，與咫炸like基因相比，TBl1ike基因存在更多的序列多態(tài)性

4、，有可能應(yīng)用于竹類植物的分子系統(tǒng)進化分析。3早竹筍microRNAs的克隆及其在出筍過程中的表達分析miRNAs與動植物的多個發(fā)育過程密切相關(guān)。近年來，上千個植物和動物的miRNAs已經(jīng)通過生物信息學和直接克隆的方法被分離和鑒定。但是，目前對于miRNAs在竹筍發(fā)育中的表達規(guī)律和功能的認識還相當缺乏。本研究開展了與竹筍發(fā)育相關(guān)(均miRNAs鑒定。首先，構(gòu)建竹筍的smallRNAs文庫，文庫所包含的克隆在100000P扶上，陽性克隆的比

5、例約在87％左右；然后利用竹筍smallRNAs文庫，對部分smallRNAs文庫克隆進行測序，其中6個竹筍smallRNAs克隆序列與其他植物miRNAsl司源，24個克隆序列沒有檢到同源序列，可能是竹筍新smallRNAs。其次通過miRNAs芯片檢測，對筍芽和鞭芽的miRNAs表達譜進行了分析。結(jié)果顯示，33個miRNAs在筍芽中表達上調(diào)，12個miRNAs在鞭芽中表達上調(diào)。進一步的表達分析表明，osamiRl561，osamiR