29423.早竹ap1squa、rev、tb1like基因的功能研究與竹筍micrornas的克隆和表達(dá)分析

1、浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院博士學(xué)位論文早竹AP1SQUA、REV、TB1like基因的功能研究與竹筍micrNAs的克隆和表達(dá)分析姓名：林二培申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：朱睦元20090501浙江大學(xué)博士學(xué)位論文察到顯著差異原位雜交結(jié)果進(jìn)一步表明這兩個(gè)基因雖然都在花分生組織中表達(dá)，但在成熟小花的雄蕊中只；有PpMADS2表達(dá)，這說gJqPpMADSl和PpMADS2：部參與了花的早期發(fā)育，即參與到了竹子的花期轉(zhuǎn)換，而刪D&還與竹子

2、小花的雄蕊發(fā)育有關(guān)，可能對早竹花的發(fā)育有更重要的作用2竹子月E胙和船J1ike基因的克隆、表達(dá)和初步的進(jìn)化分析大部分栽培的竹種主要通過竹鞭進(jìn)行繁殖，鞭芽發(fā)育成竹筍或者竹鞭的機(jī)理目前還不清楚。已經(jīng)證實(shí)REVOLUTA(REV)likeClassIIIhomeodomainleucinezipper(1iD—Zip)蛋白和TEOSlNTEBRANCHED1(TBI)一like轉(zhuǎn)錄因子已經(jīng)證實(shí)在植物分生組織的啟動(dòng)和向外生長中起重要的調(diào)控作用。

3、本研究從早竹中克隆到肛阼(PpHBl)和TBllike(PpTBI)基因，并對它們的表達(dá)和系統(tǒng)進(jìn)化進(jìn)行了初步分析。原位雜交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)PpHBl主要在側(cè)芽的頂端，葉的內(nèi)側(cè)以及發(fā)育中前形成層中表達(dá)，表明印冊』與鞭芽形成和前形成層的發(fā)育有關(guān)。而PpTBl主要在處于發(fā)育后期的芽的頂部的表達(dá)，表明它的功能可能與芽的向外生長有關(guān)這些結(jié)果暗示這兩個(gè)基因可能在竹子鞭筍發(fā)育中有重要的功能。此外，與咫炸like基因相比，TBl1ike基因存在更多的序列多態(tài)性

4、，有可能應(yīng)用于竹類植物的分子系統(tǒng)進(jìn)化分析。3早竹筍microRNAs的克隆及其在出筍過程中的表達(dá)分析miRNAs與動(dòng)植物的多個(gè)發(fā)育過程密切相關(guān)。近年來，上千個(gè)植物和動(dòng)物的miRNAs已經(jīng)通過生物信息學(xué)和直接克隆的方法被分離和鑒定。但是，目前對于miRNAs在竹筍發(fā)育中的表達(dá)規(guī)律和功能的認(rèn)識(shí)還相當(dāng)缺乏。本研究開展了與竹筍發(fā)育相關(guān)(均miRNAs鑒定。首先，構(gòu)建竹筍的smallRNAs文庫，文庫所包含的克隆在100000P扶上，陽性克隆的比

5、例約在87％左右；然后利用竹筍smallRNAs文庫，對部分smallRNAs文庫克隆進(jìn)行測序，其中6個(gè)竹筍smallRNAs克隆序列與其他植物miRNAsl司源，24個(gè)克隆序列沒有檢到同源序列，可能是竹筍新smallRNAs。其次通過miRNAs芯片檢測，對筍芽和鞭芽的miRNAs表達(dá)譜進(jìn)行了分析。結(jié)果顯示，33個(gè)miRNAs在筍芽中表達(dá)上調(diào)，12個(gè)miRNAs在鞭芽中表達(dá)上調(diào)。進(jìn)一步的表達(dá)分析表明，osamiRl561，osamiR