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1、浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院碩士學(xué)位論文魚(yú)類IL1β和IL1R1like基因的分子克隆和鑒定姓名:王浩申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:邵健忠20091215浙江人學(xué)頒|j學(xué)位論文摘要AbstractInterleukin1playsanimportantroleinthelocalandsystemicinflammatoryresponse,includingIL—letandIL113(namedasIL一1F1andIL一1F
2、2,respectively)Atpresent,theInterleukin1familyarisedinvertebratesconsistsof11knowngenesencodingligands(IL1F1toIL一1F11)Buttodate,noorthologuetoIL一1pisfoundinfishorotherlowvertebratesIL1functionsbybindingtheirreceptors,IL一
3、1ReceptortomediatesignaltransductiontorealizetheirbiologicaleffectsIL1ReceptorfamilycontainstypeIreceptors(IL一1RI),typeIIreceptors(IL一1R2),andtheIL一1receptoraccessoryprotein(IL一1RAP)Inthisstudywedevelopedbioinformaticsme
4、thodsbasedongenomicdatabases,successfullyclonedIL113geneandIL1R—likegeneinTetraodon,andobtainedrecombinantTNIL一113proteinandrabbitantiIL113serumTNIL一1BcDNAcontains4exons,3intronsanda774bpopenreadingframe(ORF)Thepeptidede
5、ducedfromORFis257aainsizeTNlL一1Bpromotercomprisesseveraltranscriptionbindingsites,suchasTATAbox,NF—KB,CEBPAPI,CCAATandSOon,3’UTRcontains5ATTTAinstabilitymoti£ArecombinedplasmidTNIL113—pET41awasobtainedbysubcloningtheORFo
6、fTNIL一1DintoprokaryoticexpressionplasmidpET41aandsequencedTarget601KdproteinwasexpressedafterIPTGinduceandpurifiedbyNiNTATNIL1Rlikegenecontains11exons,anda1902bpORFcoding633aa,whichhas3IgDomain,1transmembranedomain(TMD),
7、and1TIRDomainAlltheresultslayfoundationinfunctionstudiesoffishIL一1BandIL一1R,andisimportantforfishimmunesystemresearchandevolutionofimmunologygenesKeywords:Fish,Tetraodon,IL一113,IL1R1like,genecloning,prokaryoticexpression
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