Il-1R1對小鼠肝損傷的作用機理研究.pdf

1、肝臟以其眾多的生理功能和獨特的再生潛力成為人和動物體內最重要的代謝器官。研究表明，肝臟在隨年齡衰老過程中，其功能似乎保持不變，這種功能的保持依賴于肝臟獨特的再生潛力。近年來，急性肝衰竭患者顯著增加，卻沒有特別有效的治療方法和藥物，尤其對于老年患者來說，急性肝衰竭死亡風險很高。
　　IL-1是體內廣泛存在的炎癥因子，IL-1信號對于生物體的損傷和感染應答至關重要。而IL-1信號通路在衰老肝臟功能維持和急性肝損傷修復過程中的作用尚未見

2、報道。IL-1R1承擔介導IL-1幾乎所有的生理功能，其在小鼠尤其是老齡小鼠肝臟損傷后的肝再生中發(fā)揮作用的機制還沒有進行研究。
　　近年來，基因敲除技術被廣泛的應用到功能基因組學研究。因此，我們引進了IL-11R1 KO小鼠，建立了IL-11R1 KO老年小鼠2/3肝切除模型和CCl4誘導的急性肝衰竭模型，從分子水平來研究IL-1R1在衰老肝臟損傷后恢復過程中發(fā)揮作用的機理。
　　野生型老年小鼠2/3部分肝切除后6h，IL-

3、1R1 mRNA就達到表達高峰，我們猜測IL-1可能通過IL-1R1介導其信號轉導來促進肝再生的啟動和肝細胞的增殖。為了深入研究IL-1R1發(fā)揮作用的機理，我們對早期炎癥因子基因Tnf-a、Emr1、Mcp-1、IL-6、Ccr2和Ifn-γ，即刻早期因子基因Fos和c-Jun，細胞周期調控基因Cyclin D1、Cyclin A2、Cyclin B1和增殖標志蛋白PCNA以及增殖相關信號通路信號分子JNK1、NF-κB和STAT3，凋

4、亡通路相關蛋白Caspase-8、Caspase-3、Bax和Bcl-2進行了檢測，結果顯示在IL-1R1 KO老年小鼠中，F(xiàn)os和c-Jun的表達在肝再生中后期有明顯下調和延遲;Cyclin D1表達量比WT小鼠降低和延遲，PCNA的表達延遲;IL-1R1 KO老年小鼠的JNK1磷酸化表達的比例相較于WT老年小鼠有顯著降低，STAT3磷酸化表達的比例在中后期降低和延遲;Bax表達在PH后6h有顯著上調，Caspase-3表達在PH后1

5、20 h顯著上調?？偟目磥?，IL-1R1 KO老年小鼠肝損傷后再生能力降低，主要通過抑制JNK1、STAT3等增殖信號通路的活化來抑制或延遲肝細胞的增殖和增強Caspase-3和Bax的表達來促進肝細胞凋亡。
　　CCl4誘導老年小鼠急性肝衰竭后，IL-1R1 mRNA的表達與Control相比在全過程都極顯著上調，說明IL-1R1在急性肝衰竭中可能發(fā)揮了重要作用。血清ALT、AST檢測以及組織切片H.E染色結果表明IL-1R1

6、KO小鼠與WT小鼠有部分差異，隨后對炎癥因子基因Tnf-a、Emr1、Mcp-1、IL-6、Ccr2、Ifn-γ，肝功能標志蛋白SOD2、PAFAH1B2、GGT1，凋亡蛋白Caspase-8、Caspase-3、Bax和Bcl-2，以及谷胱甘肽GSH進行檢測，結果顯示IL-1R1 KO老年小鼠的TNF-α和Mcp-1的表達大部分時間低于WT老年小鼠，Ifn-γ、Ccr2和Emr1的表達僅在少數時間點低于WT老年小鼠;SOD2、PAFA