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文檔簡介
1、目的:探討IL-33在小鼠肝臟缺血再灌注損傷中的作用及其可能機(jī)制,為臨床選擇有效方法降低肝臟缺血再灌注損傷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:32只C57BL/6小鼠,隨機(jī)分成四組,即(1)缺血再灌注組(I/R組,n=8):小鼠開腹后阻斷肝十二指腸韌帶,使肝缺血20min后再恢復(fù)灌注,再灌注6h后采集血液與肝臟標(biāo)本;(2)IL-33預(yù)處理組(IL-33組,n=8):小鼠在開腹前12h、1h分別經(jīng)腹腔注射用PBS液稀釋的IL-332.5μg,
2、余處理同I/R組;(3)PBS對照組(PBS組,n=8):小鼠在開腹前12h、1h分別腹腔注射與IL-33組等體積PBS液,余處理同I/R組;(4)假手術(shù)組(sham組,n=8):小鼠開腹后僅游離肝十二指腸韌帶,不作肝缺血再灌注,余處理同I/R組。實(shí)驗(yàn)檢測指標(biāo):(1)采用全自動(dòng)生化分析儀測定血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)與天門冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST);(2)經(jīng)HE切片染色光鏡下觀察肝組織顯微結(jié)構(gòu)變化;(3)采用Elisa法檢測血清白細(xì)胞介
3、素-1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及肝組織中髓過氧化物酶(MPO)含量;(4)免疫組化法檢測肝組織細(xì)胞間粘附分子-1(ICAM-1)表達(dá)量;(5)用Western blot法測定并計(jì)算肝組織NF-κB活化P65(P-P65)占β-actin的比例。
結(jié)果:1.血清ALT、AST、IL-1β和TNF-α水平,I/R組、PBS組、IL-33組均明顯高于sham組,而IL-33組低于I/P組、PBS組(P<0.0
4、5)。
2.I/R組、PBS組、IL-33組肝組織中MPO含量與ICAM-1表達(dá)量較sham組均明顯升高,但I(xiàn)L-33組低于I/P組與PBS組(P<0.05)。
3.肝臟損傷病理分級評分,與sham組比較,I/R組與PBS損傷最明顯,IL-33組肝臟損傷輕于I/R組與PBS組(P<0.05)。
4.肝組織NF-κB P-P65/β-actin值,I/R組、PBS組、IL-33組較sham組升高(P<0.05
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