肢體缺血預(yù)處理對腦缺血再灌注損傷大鼠自噬的影響.pdf

1、目的：
　　急性缺血性腦卒中（Acute ischemic stroke，AIS）是一種復(fù)雜的多因素疾病,傳統(tǒng)的治療手段是恢復(fù)缺血區(qū)的血流灌注，但是這種方法會引起缺血再灌注損傷（IRI）。在這種情況下，需要對新的神經(jīng)保護措施進行探索。肢體缺血預(yù)處理(limb ischemic preconditioning，LIPC)，是指預(yù)先對肢體進行反復(fù)短暫的缺血再灌注處理，激發(fā)機體的內(nèi)源性保護機制，從而對遠(yuǎn)隔缺血器官產(chǎn)生保護作用。但是關(guān)于L

2、IPC的作用機制至今尚未完全明確,特別是自噬在其中的作用機制。
　　方法：
　　將60只Wistar大鼠按隨機原則分為假手術(shù)組（Sham組）、缺血再灌注組（I/R組）、肢體缺血預(yù)處理組（LIPC組）、3-甲基嘌呤組（3-MA組），每組15只。制作腦缺血再灌注、LIPC及3-MA干預(yù)大鼠模型,在腦缺血2h再灌注24h后進行神經(jīng)功能缺陷評分和腦梗死體積測定，HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，Western Bloting法檢測自噬相關(guān)

3、蛋白Beclin-1、Cathepsin B的表達。
　　結(jié)果：
　　1、神經(jīng)功能缺陷評分：Sham組反應(yīng)靈敏，無神經(jīng)功能障礙，與Sham組比較，I/R組，LIPC組，3-MA組均出現(xiàn)程度不同的神經(jīng)功能障礙（P＜0.05）。與I/R組比較，LIPC組癥狀評分明顯降低（P＜0.05）。LIPC組與3-MA組比較無顯著差異（P＞0.05）。
　　2、腦梗死體積測定：TTC染色后，肉眼觀Sham組腦組織呈紅色，無腦梗死。與S

4、ham組比較，I/R組，LIPC組，3-MA組均出現(xiàn)程度不同的腦梗死（P＜0.05），梗死區(qū)為白色，其中I/R組的梗死區(qū)面積最大。與I/R組比較，LIPC組腦梗體積顯著減?。≒＜0.05）；與LIPC組比較，3-MA組腦梗體積減?。≒＜0.05）。
　　3、病理形態(tài)學(xué)觀察：HE染色后，使用光學(xué)顯微鏡進行觀察，Sham組細(xì)胞形態(tài)呈圓形或橢圓形，間隙正常，胞膜完整，胞核清晰、居中，胞質(zhì)可見尼氏小體。與Sham組比較，I/R組細(xì)胞呈急性

5、缺血性改變，胞質(zhì)為深紅染，細(xì)胞縮小變形，胞核固縮，胞質(zhì)內(nèi)尼氏小體消失（P＜0.05）。與I/R組比較，LIPC組腦組織病理學(xué)改變明顯減輕（P＜0.05）；與LIPC組比較，3-MA組細(xì)胞損傷減輕（P＜0.05）。
　　4、腦缺血再灌注后各組自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、Cathepsin B的表達：與Sham組比較，I/R組Beclin-1、Cathepsin B的蛋白表達明顯增強（P＜0.05）；與I/R組比較，LIPC組Bec