IL-22-Reg生物軸對肝損傷修復(fù)的作用研究.pdf

1、目的：研究IL-22在肝損傷治療中的作用；探討IL-22誘導(dǎo)上調(diào)的Reg蛋白能否作為肝細胞再生及評估預(yù)后的標記。
　　方法：構(gòu)建IL-22重組慢病毒。體外培養(yǎng)人正常肝細胞L02，熒光顯微鏡下觀察感染IL-22重組慢病毒后1、3、5天的感染效率；ELISA檢測L02中IL-22的表達。設(shè)置3個處理組，分別為A:感染IL-22重組慢病毒組，B:感染空慢病毒組，C:未感染組。處理后48小時，RT-PCR檢測L02細胞中結(jié)合珠蛋白mRNA

2、的表達；MTT法檢測處理后48、72、96小時 L02細胞的增殖活性；免疫細胞化學檢測處理后24小時 L02細胞中增殖核抗原（PCNA）的表達。構(gòu)建大鼠急性肝損傷模型，按1.8g/kg的劑量一次性腹腔注射D-氨基酸半乳糖（D-gal）2h后，分為2組進行處理，分別為A:注射IL-22重組慢病毒組，B:注射空慢病毒組。慢病毒感染1、3、5天后大鼠肝組織切片病理檢測；Western blot檢測肝組織 RegI、RegIII、RegIV的表

3、達情況；試劑盒檢測 SOD和 MDA水平；收集大鼠靜脈血檢測TB、ALT、AST、ETM水平。
　　結(jié)果：IL-22重組慢病毒感染 L02細胞第3天的感染效率最高，可達90.12±3.45％。ELISA檢測感染后第3天，L02細胞中IL-22的表達明顯高于第1天和第5天（P＜0.05）。感染IL-22重組慢病毒組L02細胞中結(jié)合珠蛋白mRNA顯著表達（P＜0.01），而感染空慢病毒組和未感染組 L02細胞中結(jié)合珠蛋白 mRNA的表

4、達無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。感染IL-22重組慢病毒組L02細胞各時間點的增殖活性均明顯高于感染空慢病毒組及未感染組（P＜0.05）；感染 IL-22重組慢病毒組L02細胞中 PCNA的表達顯著高于感染空慢病毒組及未感染組（P＜0.01），而感染空慢病毒組和未感染組L02細胞中PCNA的表達無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。在大鼠急性肝損傷模型中，感染慢病毒1、3、5天后處死大鼠。感染慢病毒后第3、5天，IL-22重組慢病毒組（A組）大

5、鼠肝臟病理變化明顯輕于空慢病毒組（B組）；IL-22重組慢病毒組（A組）大鼠肝臟RegIV的表達在各時間點均高于空慢病毒組（B組）（P＜0.05），RegI在感染后第1、3天顯著高于空慢病毒組（B組）（P＜0.05），RegIII在感染后第1天顯著高于空慢病毒組（B組）（P＜0.05）；IL-22重組慢病毒組（A組）大鼠肝組織MDA水平在感染后第1、3、5天均明顯低于空慢病毒組（B組）（P＜0.05）。大鼠肝組織SOD水平在感染后第1、

6、3、5天顯著高于空慢病毒組（B組）（P＜0.05）；IL-22重組慢病毒組（A組）大鼠靜脈血中TB、ALT、AST、ETM水平在感染后第3、5天明顯低于空慢病毒組（B組）（P＜0.05）。
　　結(jié)論：IL-22可以促進L02細胞結(jié)合珠蛋白mRNA及PCNA的表達，并能增強 L02細胞的增殖活性。在大鼠急性肝損傷模型中，IL-22可發(fā)揮抗炎抗氧化作用，改善肝功能，并誘導(dǎo)肝組織 Reg蛋白表達，尤其是 RegIV蛋白顯著升高，可能成為