rhBMP-7對(duì)牙髓細(xì)胞的生物學(xué)作用及牙髓損傷修復(fù)作用的初步研究.pdf

1、骨形成蛋白(Bonemorphogeneticprotein，BMP)是一種廣泛分布于動(dòng)物骨組織中的酸性蛋白質(zhì)，rhBMP作為蓋髓劑可促進(jìn)修復(fù)性牙本質(zhì)的形成，但對(duì)其作用機(jī)制尚不清楚。研究顯示成纖維細(xì)胞在rhBMP-7的作用下堿性磷酸酶和骨鈣素的合成上調(diào)，在體外可形成礦化結(jié)節(jié)；成纖維細(xì)胞、心肌細(xì)胞等在rhBMP-7的誘導(dǎo)下在體內(nèi)可異位成骨。那么，rhBMP-7對(duì)牙髓細(xì)胞會(huì)有什么影響呢？作用機(jī)理是什么？將rhBMP-7作為蓋髓劑應(yīng)用于臨床保

2、存活髓治療的前景如何呢？為了初步回答以上問(wèn)題，我們做了如下體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)研究。
　　1.原代培養(yǎng)人牙髓細(xì)胞至第5代，在培養(yǎng)液中加入不同濃度梯度的rhBMP-7，將被rhBMP-7處理不同天數(shù)后的人牙髓細(xì)胞進(jìn)行MTT實(shí)驗(yàn)和堿性磷酸酶檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示當(dāng)rhBMP-7濃度為60μg/L時(shí)，既可以顯著增強(qiáng)牙髓細(xì)胞的增值能力又可有效提高牙髓細(xì)胞的堿性磷酸酶活性。
　　2.用濃度為60μg/L的rhBMP-7培養(yǎng)液浸泡處理大鼠新鮮牙髓

3、組織后移植至同種異體大鼠的腎被膜下和頭部皮下，于移植不同時(shí)間后處死動(dòng)物，取移植組織切片觀察。分別進(jìn)行HE，和VonKossa染色觀察鈣化情況。結(jié)果顯示被rhBMP-7處理過(guò)的大鼠牙髓組織在移植后數(shù)天發(fā)生不同程度的鈣化。鈣化呈點(diǎn)塊狀或多團(tuán)塊聚集狀。
　　3.方法同2，切片后進(jìn)行DSPP，OC和OPN免疫組化染色。結(jié)果顯示OC,OPN有不同程度的明顯表達(dá)，DSPP表達(dá)不明顯。rhBMP-7促使大鼠牙髓組織發(fā)生鈣化的主導(dǎo)原因是成骨作用，