低氧對人牙髓細胞增殖與遷移能力的作用研究.pdf

1、一彌Rk璁青￡稱申＆g位師業(yè)學導專中山大學碩：：學位論文低氧對人牙髓細胞增殖與遷移能力的作用研究組SDF—10【對低氧HDPCs的體外遷移作用。方法：①采用組織塊酶消化法進行HDPCs的原代培養(yǎng)，免疫細胞化學鑒定細胞來源。取第3～5代HDPCs，用20％與l％氧氣濃度分別培養(yǎng)6h、12h、18h、24h，MTT法觀察細胞增殖能力的變化；②熒光定量PCR檢測低氧處理0h、6h、12h、18h、24h后HDPCs中HIF一10【、CXCR4

2、與SDF1etmRNA表達量的改變；(鴦Transwell實驗觀察低氧HDPCs的遷移能力，探討100ng／mlrhSDF1a作用10h后對低氧HDPCs的體外遷移作用。結果：①組織塊酶消化法可有效進行HDPCs的原代培養(yǎng)，免疫細胞化學顯示所獲得細胞抗波形絲蛋白染色陽性，抗角蛋白染色陰性。用20％與l％氧氣濃度分別培養(yǎng)HDPCs6h、12h、18h、24h后，MTT結果顯示各觀察時間點低氧組OD值均高于常氧組，差異具有統(tǒng)計學意義(尸n笏

3、)，CXCR4與SDF—lamRNA表達量的差異具有統(tǒng)計學意義(尸D05)。與常氧組相比，低氧18h組CXCR4mRNA表達量上調(尸n∞)，低氧6h組、低氧18h組、低氧24h組SDF1amRNA表達量下調(PO05)。③Transwell實驗結果表明，1％低氧處理可增強HDPCs的遷移能力，同時lOOng／mlrhSDF10c作用10h體外趨化低氧HDPCs的細胞數(shù)多于常氧HDPCs(PD酊)。結論：低氧培養(yǎng)HDPCs24h內有效促