30182.藻菌混合固定化培養(yǎng)及其在海水人工育苗中的應(yīng)用研究

1、福建師范大學(xué)碩士學(xué)位論文藻菌混合固定化培養(yǎng)及其在海水人工育苗中的應(yīng)用研究姓名：張國海申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：莊惠如20090601中文文摘中文文摘固定化技術(shù)最早為日本微生物學(xué)家繁一郎(1969)所創(chuàng)建。并用于固定化酶，隨后，這種技術(shù)逐漸用于細(xì)菌、酵母、微藻等活細(xì)胞的固定化培養(yǎng)。有關(guān)固定化技術(shù)的應(yīng)用研究多涉及污水處理、代謝產(chǎn)物的生產(chǎn)、生物傳感器和種質(zhì)保存等領(lǐng)域。尤其在環(huán)境領(lǐng)域，固定化微生物用于去處廢水中的氮、磷和重金屬已

2、展示出可喜成果與廣闊的應(yīng)用前景。近年來，在養(yǎng)殖水體中施用益生菌、微藻來改善養(yǎng)殖生態(tài)環(huán)境的方法已廣為應(yīng)用，但該法存在易受環(huán)境影響及引起二次污染的問題。目前人們把固定化益生菌或微藻引入水體，取得了顯著的成效，避免了二次污染問題。而利用微藻和益生菌進(jìn)行混合固定化，通過它們的代謝互補(bǔ)，在污水處理上能夠取得比單獨(dú)固定更好的效果。但迄今為止，針對水產(chǎn)養(yǎng)殖用的混合固定化藻菌研究尚未見報(bào)道。本研究擬篩選有效的微生物種類，構(gòu)建高產(chǎn)穩(wěn)定的固定化藻菌生物反應(yīng)

3、器，開發(fā)適于海水育苗環(huán)境水質(zhì)改良與高效供餌的新方法新技術(shù)。研究結(jié)果對于解決目前人工育苗環(huán)境的水質(zhì)污染以及種苗的高死亡率問題，加速實(shí)現(xiàn)水體生態(tài)調(diào)控的健康養(yǎng)殖目標(biāo)，具有重要的現(xiàn)實(shí)應(yīng)用意義。本研究的主要內(nèi)容有以下四方面：1、本研究用的微藻是80年代分離自福建自然海區(qū)的優(yōu)質(zhì)海洋餌料微藻，但其分類位置一直無法確定。為此，對該藻的超微結(jié)構(gòu)、脂肪酸組成和18SrDNA序列進(jìn)行了研究和分析。電鏡觀察結(jié)果表明，該藻色素體外膜與核外膜相連、類囊體片層4個(gè)成

4、一組，以及具有脂質(zhì)顆粒等特征均與微擬球藻屬的特征一致。脂肪酸組成分析結(jié)果表明，該藻的C16：0、C16：ln7和C20：5n3的含量分別為421％、244％和88％，為細(xì)胞內(nèi)主要脂肪酸，●不含18：3n3和16：4n3，這些特點(diǎn)與微擬球藻很相似；通過GeneBank進(jìn)行18SrRNA基因序列比對，發(fā)現(xiàn)其與Nannochloropsissp屬的相似度達(dá)到99％以上，而與其他屬的相似度則比較低，通過建立系統(tǒng)進(jìn)化樹，發(fā)現(xiàn)其與Nannochlo

5、ropsisoceanica的進(jìn)化關(guān)系最近，而與小球藻的序列同源性則很低。綜合云微藻的形態(tài)、生理生化、分子分類特征，認(rèn)為其應(yīng)該屬于大眼藻綱，微擬球藻屬的種類。2、從海水益生菌劑中分離出四株細(xì)菌，通過把它們分別與本研究所選的餌料微藻進(jìn)行混合固定化培養(yǎng)，比較它們的促藻生長和自身生長情況，篩選一株促藻生長效果最好的細(xì)菌作為共固定的菌種來源，該菌株經(jīng)菌落形態(tài)和細(xì)胞形態(tài)觀察并結(jié)合16SrDNA初步鑒定，為枯草芽孢桿菌屬細(xì)菌。3、通過單因子實(shí)驗(yàn)，發(fā)