胰蛋白酶的固定化技術及其在水產加工中的應用研究.pdf

1、作為功能性材料的殼聚糖、脫乙酰殼聚糖，由于其一系列獨特的性質作為固定化酶載體材料已經廣泛應用于釀酒工業(yè)、制糖工業(yè)、漁業(yè)、廢水處理、環(huán)境污染的定點測控等研究領域。固定化酶比游離酶具有多方面的優(yōu)點。本文以多孔殼聚糖球為載體，戊二醛為交聯(lián)劑制備固定化胰蛋白酶，研究了多孔殼聚糖球載體的制備條件、固定化反應中戊二醛濃度、給酶量、pH值、溫度、固定化時間對固定化胰蛋白酶活力的影響。并進一步對固定化胰蛋白酶的性質，固定化胰蛋白酶水解鰱魚蛋白的條件，以

2、及鰱魚蛋白的水解度，水解產物中可溶性蛋白得率，氮溶指數(shù)進行了研究。 通過研究確定了制備多孔殼聚糖球載體的最佳條件為：殼聚糖濃度3％，凝結液為：4％NaOH：95％乙醇(4:1)，室溫處理3h。固定化胰蛋白酶的條件為：每克載體加入交聯(lián)劑(用pH值7.0緩沖液配制戊二醛)5mL，濃度為0.50％，活化溫度為25℃，150rpm條件下振蕩活化2h，酶液的濃度為7mg/mL(用pH7.0緩沖液配制)，加酶量5mL/g載體，固定化溫度15

3、℃，150rpm振蕩固定化24h。在此條件下固定化胰蛋白酶活力472.39u/g固定化酶，固定化效率42.9％。固定化胰蛋白酶的最適反應溫度范圍30℃～60℃，游離胰蛋白酶的最適反應溫度50℃；固定化胰蛋白酶的最適pH值范圍7.0～9.0，游離胰蛋白酶最適pH值范圍7.0～7.5。固定化胰蛋白酶的熱穩(wěn)定性和pH值穩(wěn)定性比游離酶有所提高。固定化酶的Km值為9.89mg/mL，游離酶的米氏常數(shù)Km值為8.99mg/mL。利用固定化胰蛋白酶水