中性蛋白酶的固定化及其在煙用香精香料中的應(yīng)用研究.pdf

1、煙用香精香料是現(xiàn)代卷煙產(chǎn)品的重要組成部分，目前煙用香精香料主要依靠對(duì)天然植物的提取、化學(xué)合成兩種途徑得到。由于人工合成的香料存在安全性爭(zhēng)議，天然植物來源的香精香料備受關(guān)注。傳統(tǒng)的提取方法雖然能夠較為全面地對(duì)植物中的致香組分進(jìn)行提取，但難以避免引入植物中的蛋白質(zhì)、纖維素、果膠等影響煙草吸味和香精香料表觀狀態(tài)的大分子物質(zhì)，因此通過對(duì)應(yīng)的酶對(duì)這類大分子物質(zhì)進(jìn)行降解可以提高煙用香精香料的品質(zhì)。由于酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，游離酶在參與酶解特定大分子

2、底物的過程中也同時(shí)對(duì)煙用香精香料產(chǎn)生污染，固定化酶在這方面的優(yōu)越性可以很好解決這一矛盾。本文制備了不同氧化度的海藻酸鈉凝膠以及幾種磁性復(fù)合二氧化硅載體，評(píng)價(jià)了固定在這些載體中性蛋白酶的酶學(xué)性能，初步考察了其處理墨旱蓮提取物的工藝。本論文的主要工作為：
　　 (1)合成了一系列不同氧化度的部分氧化改性海藻酸鈉凝膠，并研究了它們共價(jià)固定化中性蛋白酶的效果。結(jié)果表明：固定化Ph，載體氧化度，給酶量等因素對(duì)酶的固定化指標(biāo)有著較大的影響。

3、
　　 (2)以磁性四氧化三鐵表面上3-氨丙基三乙氧基硅氧烷和正硅酸乙酯之間簡(jiǎn)單聚合反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過戊二醛交聯(lián)和丙烯酸甲酯接枝制備了幾種磁性復(fù)合二氧化硅載體。其中經(jīng)戊二醛交聯(lián)的載體固定化效果最好，最佳固定化條件為：0.5％戊二醛用量為30 Ml，交聯(lián)時(shí)間為2 小時(shí)；加酶量為15mg/0.1g 載體，固定化時(shí)間為50min。
　　 所得到的固定化酶活力達(dá)2500U/g 載體。
　　 (3)以墨旱蓮提取物作為酶解底物