固定化胰蛋白酶酶解酪蛋白產生酪蛋白磷酸肽的條件研究.pdf

1、酪蛋白是乳中含量最豐富的蛋白質，含有人體生長發(fā)育所必需的氨基酸。近年來的研究結果表明，酪蛋白除具有營養(yǎng)功能之外，還具有非常重要的生理功能，是生物活性肽的重要來源。其中酪蛋白磷酸肽在動物的小腸環(huán)境中能防止二價金屬離子產生沉淀，增加腸內可溶性礦物質的濃度，從而促進腸黏膜對鈣、鐵、鋅、硒的吸收和利用，尤其是鈣的吸收和利用，被譽為“礦物質載體”。酪蛋白磷酸肽是目前唯一一種促進鈣吸收的活性肽，同時對提高機體免疫力、改善繁殖性能等方面也有重要作用。

2、 研究了胰蛋白酶的固定化條件，以殼聚糖為載體，戊二醛為交聯(lián)劑，采用交聯(lián)．吸附法對胰蛋白酶進行固定化。分析了酶用量、戊二醛濃度、pH值、溫度、交聯(lián)時間以及吸附時間等因素對固定化酶活力和活力回收率的影響。從中選擇較顯著的四個因素進行L9（34）正交實驗，以酶活力為指標，對胰蛋白酶的固定化條件進行優(yōu)化，以獲得固定化的最佳反應條件。 殼聚糖固定化胰蛋白酶，最佳固定化條件為：酶用量14mg，戊二醛濃度0．2％，pH值7．5，溫度3

3、5℃，交聯(lián)時間2h，吸附時間5h。在最佳固定化條件下制得的固定化酶活性為397．29U，活力回收率達76．57％。 用制備好的固定化酶裝柱進行連續(xù)水解制備酪蛋白磷酸肽，以水解液的△pH值和N/P為實驗指標，重點討論了酶裝柱水解過程中pH值、底物濃度、溫度、底物流速等因素的最佳作用條件。固定化酶裝柱水解最佳作用條件為：溫度60℃，底物濃度4％，pH值為9．0，恒流泵轉速為20r/min。 利用交聯(lián)葡聚糖（Sephadex