27685.酪蛋白酶解肽譜對樹突狀細(xì)胞成熟的影響

1、分類號密級天津商業(yè)大學(xué)碩士研究生畢業(yè)(學(xué)位)論文姓名：張郢年級：oo七級專業(yè)：發(fā)酵工程研究方向：生物活性物質(zhì)的分離純化論文題目：酪蛋白酶解肽譜對樹突狀細(xì)胞成熟的影響導(dǎo)師：龐廣昌教授完成日期：二。一。年五月天津商業(yè)大學(xué)摘要酪蛋白經(jīng)水解制得的多肽是重要的生物活性肽，具有免疫調(diào)節(jié)能力。本研究分別利用胰蛋白酶及胃蛋白酶的酶解酪蛋白，經(jīng)乙醇、超濾以及SephadexG25兩次分離純化后，制備兩種不同的酪蛋白水解多肽。一方面以Balb／c小鼠為實驗

2、動物，分別將同一濃度的胰蛋白酶水解的酪蛋白多肽通過口服，腹腔注射和靜脈注射給藥。利用懸浮液體芯片系統(tǒng)，檢Nd鼠外周血血清中24種細(xì)胞因子的濃度變化，研究胰蛋白酶酪蛋白水解多肽對小鼠細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的影響并推測產(chǎn)生的先天免疫應(yīng)答。結(jié)果灌胃組中，大部分細(xì)胞因子的水平是升高的，抗炎細(xì)胞因子IL5，IL9，IL10，MIP1僅是降低的，說明酪蛋白水解多肽促進(jìn)發(fā)炎細(xì)胞因子的合成，具有刺激免疫升高的作用。腹腔注射組與此類似。靜脈注射的酪蛋白水解多肽對細(xì)

3、胞因子水平的影響與灌胃組、腹腔注射組相比明顯不同。因為多肽不經(jīng)過腸粘膜免疫系統(tǒng)直接進(jìn)入血液，推測通過激活多種免疫細(xì)胞內(nèi)部不同的信號途徑影響了細(xì)胞因子的基因表達(dá)。另一方面誘導(dǎo)培養(yǎng)C57BL／6雄性小鼠骨髓源的樹突狀細(xì)胞(Dendriticcells，DCs)用不同濃度的水解多肽刺激DCs，在48h后進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測，鑒定DCs的成熟程度，并將成熟后的DCs與T細(xì)胞共孵育96h，CCK8檢測T細(xì)胞增殖。結(jié)果表明：兩種酶水解酪蛋白多肽均能夠