胰蛋白酶及其制劑的毒理學試驗研究.pdf

1、胰蛋白酶(Trypsin)是最早發(fā)現(xiàn)于胰液消化蛋白質(zhì)中的酶。胰蛋白酶在脊椎動物消化系統(tǒng)中是一種重要的消化酶，其在胰臟中先以胰蛋白酶原的形式而被合成，然后隨胰液從胰島管進入小腸，在小腸內(nèi)經(jīng)腸激酶激活后活化為胰蛋白酶。胰蛋白酶能特異性的切斷多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基的羧基側(cè)。胰蛋白酶還能激活其他一些酶的前體，例如羧肽酶原、糜蛋白酶原等，是一種特異性非常強的蛋白酶。胰蛋白酶作為一種蛋白水解酶，能降解變性的蛋白質(zhì)，對未變性的蛋白質(zhì)則不起作用。因

2、此，胰蛋白酶能分解膿液、血凝塊等，利于膿液的引流排除，從而使壞死創(chuàng)面凈化速度加快，并能促進肉芽組織的新生。在人醫(yī)臨床上主要用于膿胸、血胸、瘺管等所產(chǎn)生的局部水腫、膿腫的治療，也用于毒蛇咬傷治療;在生物科技上常用于細胞培養(yǎng)。目前關于胰蛋白酶在獸醫(yī)臨床上的應用報道鮮見，胰蛋白酶尚未作為獸用藥物在國內(nèi)進行注冊。依照農(nóng)業(yè)部獸藥評審中心獸藥注冊資料匯編的毒理學試驗規(guī)定，本研究對胰蛋白酶原料藥進行了包括小鼠急性毒性試驗、大鼠30天喂養(yǎng)亞慢性毒性試驗

3、、小鼠骨髓細胞微核試驗，以及復合蛋白酶乳房注入劑在家兔的皮膚和黏膜刺激試驗、皮膚致敏試驗在內(nèi)的一般毒理學試驗研究。
　　給小鼠灌服劑量分別為40 mg/kg，200mg/kg，1000mg/kg，5000mg/kg和8000 mg/kg的胰蛋白酶原料藥進行急性毒性試驗，結果顯示，胰蛋白酶的LD50＞5000 mg/kg，根據(jù)化學物質(zhì)急性毒性劑量分級表判定胰蛋白酶原料藥屬于實際無毒物質(zhì);給大鼠灌服為期30 d的劑量分別為高劑量(80

4、0 mg/kg)、中劑量(400 mg/kg)、低劑量(200 mg/kg)的胰蛋白酶原料藥進行亞慢性毒性試驗，試驗結果顯示，各個劑量組的大鼠均未出現(xiàn)明顯中毒情況，受試大鼠的血液常規(guī)、血液生化指標中盡管有個別指標與對照組相比有顯著差異，但數(shù)值均處于正常范圍內(nèi)，臟器系數(shù)指標與對照組均無顯著差異，病理組織學檢查也未見異常。將復合蛋白酶乳房注入劑涂在家兔背部完整皮膚，觀察其對皮膚的刺激和致敏情況;同時將復合蛋白酶乳房注入劑注入家兔陰道，觀察其