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文檔簡(jiǎn)介
1、背景:胰腺癌(Pancreatic Cancer)是一種較常見的消化道惡性腫瘤,其有三大特點(diǎn):位置隱蔽、缺少早期典型癥狀;發(fā)現(xiàn)時(shí)已是晚期、轉(zhuǎn)移擴(kuò)散快;存活期極短、病死率極高。近年發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì),每10年約增加15%。胰腺癌多發(fā)生在40歲以上,在青少年中亦少見發(fā)生。男性多見,男女之比為2-4:1。胰腺癌在歐美國(guó)家高發(fā),是歐洲、北美和其他經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)國(guó)家腫瘤發(fā)病和腫瘤死亡的主要原因之一。日本胰腺癌的發(fā)病率亦明顯上升,我國(guó)國(guó)內(nèi)胰腺癌的發(fā)病率
2、亦有明顯上升。PEST-containing nuclear protein(PCNP)是一種新的含PEST序列核蛋白,主要存在細(xì)胞核內(nèi),并且具有泛素化能力的蛋白連接酶。研究發(fā)現(xiàn) PCNP不但與細(xì)胞周期的調(diào)控有關(guān),而且可能參與細(xì)胞增殖、凋亡、分化、轉(zhuǎn)移、基因表達(dá)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、信號(hào)傳遞的調(diào)控。CTGF(connective tissue growth factor,結(jié)締組織生長(zhǎng)因子)是在1991年從人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)基分離出來的一種分泌
3、性蛋白。是即可早期基因CCN家族的成員,又稱為CCN2,由349個(gè)氨基酸殘基組成的,富含半胱氨酸的結(jié)合肝素的分泌性多肽,相對(duì)分子質(zhì)量為36-38KD,由高爾基體分泌。最初研究發(fā)現(xiàn)CTGF對(duì)成纖維細(xì)胞具有趨化及促有絲分裂作用,隨后發(fā)現(xiàn)按不同的細(xì)胞類型,CTGF還具有促細(xì)胞增殖、遷移及分化等作用。近來,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn), CTGF與包括血管、皮膚、心臟、腎臟、胰腺、肺及肝臟等在內(nèi)的許多組織器官纖維化發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。目前國(guó)內(nèi)大量研究過CTGF
4、在胰腺癌中的表達(dá)變化及其相關(guān)因素的關(guān)系,但從未研究過CTGF和PCNP在胰腺癌中的表達(dá)是否有相關(guān)性。我們的實(shí)驗(yàn)將研究CTGF和PCNP在胰腺癌發(fā)病中的作用,并探討二者在胰腺癌中的相互關(guān)系。
目的:收集胰腺癌的手術(shù)切除標(biāo)本和體外培養(yǎng)胰腺癌細(xì)胞株(Panc-1),觀察 CTGF和 PCNP在胰腺癌組織中的表達(dá)情況,分析二者在胰腺癌中表達(dá)的意義以及相關(guān)性。為胰腺癌的發(fā)病機(jī)制提供線索,并為胰腺癌診斷、治療以及新藥研發(fā)提供理論依據(jù)。
5、r> 方法:⑴采用免疫組化技術(shù)檢測(cè)來自臨床各期的胰腺癌的手術(shù)切除標(biāo)本及其癌旁胰腺組織中的PCNP和CTGF的表達(dá)情況,分析表達(dá)水平與胰腺癌病人臨床分期、組織學(xué)分類、轉(zhuǎn)移之間的關(guān)系。⑵利用PCR技術(shù)檢測(cè)穩(wěn)定胰腺癌Panc-1細(xì)胞和對(duì)照組中PCNP與CTGF基因表達(dá)差異。通過Western blot實(shí)驗(yàn)研究PCNP與CTGF蛋白表達(dá)的相互關(guān)系。利用MTT實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)對(duì)Panc-1細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、周期及凋亡的影響。
結(jié)果:
6、①CTGF主要表達(dá)于胞漿或胞膜,間質(zhì)細(xì)胞中亦有表達(dá)。在胰腺癌組織中,CTGF表達(dá)陽性率為81.08%,在癌旁組織中,CTGF表達(dá)陽性率11.1%,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。②PCNP主要表達(dá)于胞核,在胰腺癌組織中,PCNP表達(dá)陽性率為78.37%,在癌旁組織中,PCNP表達(dá)陽性率22.2%,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。③胰腺癌組織中CTGF的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及分期有相關(guān)性,PCNP與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及臨分期有一定的相關(guān)性,在胰腺癌中PC
7、NP的表達(dá)與CTGF的表達(dá)有密切的相關(guān)性(P<0.05)。④Western blotting檢測(cè)到 CTGF、PCNP蛋白在胰腺癌Panc-1細(xì)胞的表達(dá)高于對(duì)照組。
結(jié)論:⑴胰腺癌組織中和癌旁組織中的CTGF陽性表達(dá)存在差異,并且與胰腺癌的分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性。⑵胰腺癌組織中和癌旁組織中的PCNP陽性表達(dá)存在差異,并且與胰腺癌的分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有相關(guān)性。⑶胰腺癌組織中的CTGF與PCNP表達(dá)存在相關(guān)性。它們的異常表達(dá)可能與
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