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文檔簡介
1、西南農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文利用染色體工程培育多倍體西番蓮(Passifloraedulis)的技術研究姓名:張琴申請學位級別:碩士專業(yè):果樹學指導教師:梁國魯2001.6.1利用秋水仙素,通過各種方法誘導西番蓮四倍體產(chǎn)生。選擇了西番蓮萌發(fā)種子、帶綠色芽點的愈傷組織和不定芽作為處理材料,用浸泡、混培等方法。其中,以處理愈傷組織和不定芽的效果好,誘變頻率高,嵌合體少,獲得了純合的四倍體植株,而處理種子獲得的變異株均為嵌合體;其中以浸泡法最為直
2、接、有效,誘變頻率高,達6 3 %:以含2 0 0 m g /L 秋水仙素的分化培養(yǎng)基處理不定芽獲得了6 7 %的誘變頻率。秋水仙素誘導產(chǎn)生的變異植株染色體數(shù)目為2 n :3 6 ,證明是四倍體植株。本試驗還對嵌合體進行了分離,以獲得穩(wěn)定的四倍體植株。方法是:將秋水仙素誘導產(chǎn)生的嵌合體葉片和莖尖切下來,接種到培養(yǎng)基H S + B A 3 .O m g /L + N A A O .2 m g /L 上誘導不定芽產(chǎn)生或芽叢形成,再分離各個芽
3、培養(yǎng)成苗,這樣反復多次的進行,最后獲得了四倍體細胞占很大比例的多倍體植株。彌補了秋水仙素誘導多倍體的不足。西番蓮四倍體的繼代培養(yǎng)與增殖:取四倍體植株的莖尖、葉片和莖段培養(yǎng)在M S + B A 3 .O m g /L + N A A O .2 m g /L 上分化不定芽或誘導腋芽伸長,增殖效果好,分化頻率達8 2 .5 %,增殖系數(shù)達4 .6 ,短期內(nèi)獲得了較大數(shù)量的四倍體植株。對西番蓮不同倍性的植株進行了形態(tài)觀察與分析。發(fā)現(xiàn)多倍體植株葉
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