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1、葉片山海綿(Mycalephyllophila)隸屬于尋常海綿綱(Demospongiae),繁骨海綿目(Poecilosclerida),山海綿科(Mycalidae),山海綿屬(Mycale),在福建東南沿岸具有比較廣泛的分布。前期的研究顯示,該海綿體內(nèi)含有大量的生物堿以及甾醇類,具有很高的核受體活性,是潛在的重要藥源生物。為了避免在開發(fā)該物種的過程中,海綿的自然資源受到嚴(yán)重破壞,課題組決定進(jìn)行先導(dǎo)化合物研究的過程中同時(shí)進(jìn)行其基礎(chǔ)生
2、物學(xué)的研究,試圖掌握其生活習(xí)性,為后期的大規(guī)模養(yǎng)殖奠定基礎(chǔ)。因此對(duì)葉片山海綿的基礎(chǔ)生物學(xué)研究顯得格外的重要。本文對(duì)葉片山海綿早期胚胎發(fā)育、幼體釋放規(guī)律、幼體附著變態(tài)、稚體生長(zhǎng)以及成體無性生殖等內(nèi)容進(jìn)行了相關(guān)研究,主要結(jié)果如下:
葉片山海綿是雌雄同體的種類,卵細(xì)胞和精細(xì)胞的發(fā)育是異步的,早期卵細(xì)胞大小為30-50μm,成熟的卵細(xì)胞大小為300-400μm;精原細(xì)胞大小為14-16μm,以精子囊的形式聚集在一起,精子囊大小為97.
3、15±12.11μm,精子為橢圓形顆粒,大小為3-5μm。葉片山海綿行體內(nèi)受精,受精卵呈現(xiàn)乳白色球形顆粒狀,大小為400-500μm,集中在孵化室中孵化,孵化室一般位于大的出水口基部,胚胎發(fā)育過程為不均等分裂;幼體在體內(nèi)發(fā)育成熟并孵化,孵化后的幼體順著出水口排出體外。葉片山海綿生殖周期和海水溫度有很大聯(lián)系,繁殖期都只出現(xiàn)在水溫較高的季節(jié)。本研究周期內(nèi)觀察到的葉片山海綿生殖細(xì)胞發(fā)育的周期為:卵細(xì)胞發(fā)育時(shí)期在6月中旬到11月中旬;精細(xì)胞發(fā)育
4、的時(shí)期為5月底到11月初;胚胎發(fā)育時(shí)期為6月中旬到11月底;幼體的釋放時(shí)期為7月初到10月底,11月海綿體內(nèi)雖然有胚胎,但是卻收集不到幼體。
葉片山海綿幼體釋放時(shí)期集中在7月到10月,每一天的釋放高峰發(fā)生在04:30-08:00,不同成體幼體釋放量差別較大,實(shí)驗(yàn)觀察到單株海綿的最大幼體日排放量達(dá)到1.24×104個(gè)。葉片山海綿幼體附著7天后出現(xiàn)明顯的出水管,在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)40天后稚體存活率都在65%以上,稚體大小從最初的500μ
5、m增長(zhǎng)到大約3mm。40天后將海綿稚體移植到海區(qū)掛養(yǎng),海區(qū)掛養(yǎng)60天后,稚體大量死亡,單個(gè)培養(yǎng)皿的最大稚體存活率只有27.78%,但是存活下來的個(gè)體生長(zhǎng)良好,200天后生長(zhǎng)直徑達(dá)到10cm。
使用腎上腺素、多巴胺以及L-多巴三種神經(jīng)遞質(zhì)激素進(jìn)行葉片山海綿幼體附著變態(tài)的研究,結(jié)果顯示三種神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)葉片山海綿幼體具有一定的毒性,不適合作為誘導(dǎo)劑用于葉片山海綿幼體附著變態(tài);研究了光照、附著基以及鹽度等物理因子對(duì)葉片山海綿幼體附著變態(tài)
6、的影響,結(jié)果顯示葉片山海綿具有負(fù)趨光性,傾向于在黑暗的環(huán)境中附著變態(tài),粗糙材質(zhì)的附著基利于幼體的附著,葉片山海綿幼體附著適合的鹽度為35。
使用繩子夾住海綿組織塊掛養(yǎng)的方式針對(duì)于葉片山海綿的增殖可行性很高。掛養(yǎng)三個(gè)月內(nèi),組織塊的存活率達(dá)到了100%,掛養(yǎng)早期組織塊主要沿繩子方向橫向生長(zhǎng),而后期才開始縱向生長(zhǎng)。因此推測(cè),葉片山海綿采取早期占據(jù)一定生長(zhǎng)空間,后期再縱向生長(zhǎng)的策略生長(zhǎng)。后期由于敵害生物以及水質(zhì)的影響,導(dǎo)致部分組織塊死
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