金針菇生活史各階段核相研究.pdf

1、金針菇Flammulina velutipes (Curtis) Singer，是擔(dān)子菌門、膨瑚菌科、小火焰菌屬的一種真菌，是一種在全球均廣受歡迎的著名的食藥用真菌。到目前為止，關(guān)于金針菇的一系列生物學(xué)特性的研究及其食藥用價(jià)值在國(guó)內(nèi)外均有相關(guān)的研究，但關(guān)于金針菇整個(gè)詳細(xì)生活史的報(bào)道研究相對(duì)較少。本論文對(duì)金針菇生活史各階段的核相及出菇機(jī)理進(jìn)行了較為全面的研究，主要內(nèi)容及結(jié)果如下:
　　1.金針菇生活史各階段的人工培養(yǎng)
　　本實(shí)

2、驗(yàn)通過進(jìn)一步的研究改良并優(yōu)化了最適宜金針菇栽培的條件，同時(shí)觀察了其生活史各個(gè)不同階段的生長(zhǎng)發(fā)育情況，觀察不同菌株子實(shí)體產(chǎn)生孢子的情況，并且收集不同菌株的孢子進(jìn)行萌發(fā)交配實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出:金針菇的菌絲在形成初期均為白色，但隨著菌絲的不斷繁殖生長(zhǎng)，不同菌株的菌絲表面會(huì)分泌出黃褐色的色素;發(fā)育成熟的異核體菌絲及部分同核體菌絲可扭結(jié)產(chǎn)生原基，繼而發(fā)育成為子實(shí)體。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明異核子實(shí)體能產(chǎn)生擔(dān)孢子，擔(dān)孢子可以萌發(fā)，發(fā)育為菌絲體;少數(shù)同核體菌絲也

3、可以產(chǎn)生子實(shí)體，但子實(shí)體呈畸形，后期不產(chǎn)生孢子。
　　2.金針菇生活史各階段的形態(tài)解剖學(xué)觀察
　　取金針菇的菌絲體、子實(shí)體和擔(dān)孢子，制作臨時(shí)裝片，用剛果紅溶液染色，普通光學(xué)顯微鏡下觀察，結(jié)果表明:金針菇同核體菌株均無鎖狀聯(lián)合，子實(shí)體擔(dān)子上不產(chǎn)生擔(dān)子小梗，不產(chǎn)生孢子;兩不同極性的單核菌絲進(jìn)行交配形成次級(jí)菌絲，有明顯的鎖狀聯(lián)合，形成的子實(shí)體的擔(dān)子上含有4個(gè)擔(dān)子小梗，最后擔(dān)孢子從小梗上脫落。單核菌絲和雙核菌絲都能產(chǎn)生粉孢子。

4、>　　對(duì)金針菇生活史各階段的菌絲體、子實(shí)體、擔(dān)孢子等進(jìn)行熒光顯微觀察研究。結(jié)果表明:金針菇單個(gè)擔(dān)孢子發(fā)育而來的同核體菌絲為單核，無鎖狀聯(lián)合，部分單孢菌株能形成同核子實(shí)體，同核子實(shí)體的原擔(dān)子中只有1個(gè)核，該核在擔(dān)子中進(jìn)行一次有絲分裂形成縱向排列的2個(gè)子核，擔(dān)子發(fā)育停止，同核子實(shí)體不產(chǎn)生擔(dān)孢子;具有可親和交配型的單孢菌絲經(jīng)過質(zhì)配形成異核體菌絲，異核體菌絲雙核，具有鎖狀聯(lián)合，能形成異核子實(shí)體，異核子實(shí)體的原擔(dān)子中具有2個(gè)核，這2個(gè)核經(jīng)過核配融

5、合為1個(gè)二倍核，二倍核在擔(dān)子中進(jìn)行減數(shù)分裂形成4個(gè)單倍子核，4個(gè)子核分別進(jìn)入4個(gè)擔(dān)孢子中，隨著擔(dān)孢子繼續(xù)發(fā)育，其中的單核再進(jìn)行一次有絲分裂，成熟擔(dān)孢子為雙核，但這2個(gè)核是同質(zhì)的。由單核菌絲和雙核菌絲產(chǎn)生的粉孢子為單核。
　　3.SNPs單核苷酸多態(tài)性在金針菇生活史研究中的應(yīng)用
　　本實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建金針菇基因組文庫(kù)，設(shè)計(jì)了17對(duì)引物，并分析得到了117個(gè)SNPs位點(diǎn)。并用這17對(duì)引物對(duì)不同采集地及不同生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期的金針菇樣品進(jìn)行

6、PCR擴(kuò)增并測(cè)序。SNPs分子標(biāo)記對(duì)金針菇生活史各階段的核相進(jìn)行了分子檢測(cè)。分子標(biāo)記還證實(shí)單核體菌株在栽培出菇的過程中可能會(huì)被其它菌株的粉孢子或擔(dān)孢子污染而變成異核體菌株。
　　根據(jù)以上研究結(jié)果，我們構(gòu)建了完整的金針菇生活史:雙核孢子萌發(fā)形成單核初生菌絲，少數(shù)初生菌絲能出菇形成同核子實(shí)體，同核子實(shí)體擔(dān)子為雙核，不產(chǎn)生擔(dān)子小梗，不產(chǎn)生孢子;兩個(gè)不同極性的初生菌絲交配形成次生菌絲，次生菌絲形成異核子實(shí)體，子實(shí)體擔(dān)子含有4個(gè)擔(dān)子小梗，最